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| 膀胱癌分子标志物基质金属蛋白酶1的可溶性表达和尿液中的活性分析 | |
| 引用本文： | 晋学飞,孔祥波,张丹,刘婷婷,王凯臣.膀胱癌分子标志物基质金属蛋白酶1的可溶性表达和尿液中的活性分析[J].分析化学,2015,43(4):582-587. |
| 作者姓名： | 晋学飞 孔祥波 张丹 刘婷婷 王凯臣 |
| 作者单位： | 1. 吉林大学中日联谊医院泌尿外科,长春,130023 2. 吉林大学中日联谊医院内分泌科,长春,130023 3. 吉林省军队离退休干部疗养中心,长春,130061 |
| 摘 要： | 通过分离人胚胎肾细胞(HEK293)中基质金属蛋白酶1(MMPl)基因序列,利用基因工程技术在大肠杆菌中表达并纯化了包涵体复性的MMP1;采用融合表达硫氧还蛋白(Thioredoxin,TrxA)的方法获得了可溶性的MMPl-TrxA复合蛋白,在TrxA蛋白和MMP1活性中心之间引入了一个肠激酶切割位点,通过酶切作用获得可溶性MMP1.明胶酶谱分析法对体外表达的MMP1和体内(尿液中)MMP1进行了分析比较.结果表明,TrxA蛋白能够显著提高MMP1的可溶性,且可溶性MMP1的明胶降解活性是复性的MMP1降解活性的1.54倍,与尿液中的MMP1的明胶酶降解活性相当.因此,明胶酶谱法是一种有效的、高灵敏的MMP1检测方法,所表达的可溶性MMP1为小分子探针筛选提供了更可靠的分子靶点. |
| 关 键 词： | 膀胱癌生物标志物 基质金属蛋白酶 分子探针筛选 明胶酶谱 |
Soluble Expression of Recombinant Bladder Cancer Biomarker Matrix Metalloproteinase-1 and Analysis of Urinary Enzyme by Gelatin Zymography |
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| JIN Xue-Fei , KONG Xiang-Bo , ZHANG Dan , LIU Ting-Ting , WANG Kai-Chen.Soluble Expression of Recombinant Bladder Cancer Biomarker Matrix Metalloproteinase-1 and Analysis of Urinary Enzyme by Gelatin Zymography[J].Chinese Journal of Analytical Chemistry,2015,43(4):582-587. | |
| Authors: | JIN Xue-Fei KONG Xiang-Bo ZHANG Dan LIU Ting-Ting WANG Kai-Chen |
| Institution: | JIN Xue-Fei;KONG Xiang-Bo;ZHANG Dan;LIU Ting-Ting;WANG Kai-Chen;Department of Urinary Surgery,Jilin University;Department of Endocrinology,China-Japan Union Hospital,Jilin University;The Retired People in Army Residents of Jilin; |
| Abstract: | |
| Keywords: | Bladder cancer biomarker Matrix metalloproteinase Probe screen Gelatin zymography |
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