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酵母丙氨酸转移核糖核酸5′-半分子(1—35)的合成
作者姓名:王德宝  吴仁龙  郑可沁  于大文  汤锦炎  祁国荣  陈常庆  朱莹书  谢恒月  王应魁  聂慧玲  陈海宝  黄建华  陈德化  庄建华  王贵海  陈慎
作者单位:中国科学院上海生物化学研究所,中国科学院上海生物化学研究所,中国科学院上海生物化学研究所,中国科学院上海生物化学研究所,中国科学院上海生物化学研究所,中国科学院上海生物化学研究所,中国科学院上海生物化学研究所,中国科学院上海细胞生物学研究所,中国科学院上海细胞生物学研究所,中国科学院上海细胞生物学研究所,中国科学院上海细胞生物学研究所,中国科学院上海有机化学研究所,中国科学院上海有机化学研究所,中国科学院上海有机化学研究所,中国科学院上海有机化学研究所,中国科学院生物物理研究所,中国科学院生物物理研究所 北京,北京
摘    要:本文报道了应用T_4RNA连接酶将酵母丙氨酸转移核糖核酸(tRNA_y~(Ala))5′-半分子中的三个寡核苷酸片段[—13(Ⅰ);14—22(Ⅱ);23—35(Ⅲ)]连接成5′-半分子的工作。由于寡核苦酸片段的纯度高,多核苷酸激酶和T_4RNA连接酶的质量好,采用连续反应的方法,简化了分离步骤,使产物的得率大大提高,二十二核苷酸的连接率是75%,三十五核苦酸的连接率是90%,以第一步反应原料为基数计算,最终产物的总得率是21%。经连接点和末端核苷酸分析,证明它的结构是正确的。将合成的5′-半分子与天然的3′-半分子在T_4RNA连接酶的催化下连接成人工半合成的完整tRNA_y~(Ala),具有接受[~3H]-丙氨酸和将[~3H]-丙氨酸转移到蛋白质中的生物活力。

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