利用无标记的分子信标及核酸染料SYBR Green Ⅰ检测乙肝病毒 |
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作者姓名: | 向东山 史伯安 翟琨 王联芝 |
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作者单位: | 生物资源保护与利用湖北省重点实验室;湖北民族学院化学与环境工程学院; |
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基金项目: | 湖北省教育厅重点项目(D20131905,D20131906);国家自然科学基金项目(21267009);生物资源保护与利用湖北省重点实验室开放基金(PKLHB1316);湖北民族学院团队项目(MY2013T003)及湖北省林业一级学科的资助 |
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摘 要: | 本文以野生型的乙型肝炎病毒(HBV)核酸片段为研究对象,利用无标记的分子信标及核酸染料SYBR Green I,建立了一种高灵敏、高选择性的特定序列核酸检测方法.在优化条件下,目标DNA浓度为4×10-11~400×10-11 mol/L之间时,SYBR Green I的荧光强度(ΔI)与目标DNA的浓度(C)具有良好的线性关系,其拟合的回归方程为ΔI=1.9556 C+31.4659(R2=0.9956),方法检测限(3ζ)为2×10-11 mol/L.该方法操作简单、检测速度快、灵敏度高、重现性好、检出限低.利用该方法,结合不对称PCR技术,实现了对HBV的定量检测.
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关 键 词: | 无标记分子信标 SYBR GreenⅠ 乙肝病毒 荧光 |
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