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流动注射-分光光度法测定天然产物对酪氨酸酶活性的影响
引用本文:罗碧,李国柱,王立军,孟庆艳,卢亚玲,刘文杰. 流动注射-分光光度法测定天然产物对酪氨酸酶活性的影响[J]. 分析测试学报, 2015, 34(4): 407-413
作者姓名:罗碧  李国柱  王立军  孟庆艳  卢亚玲  刘文杰
作者单位:塔里木大学生命科学学院,新疆阿拉尔843300;新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护与利用重点实验室,新疆阿拉尔843300
基金项目:国家自然科学基金项目(21365018) ;新疆生产建设兵团科技攻关项目( 2011AB030)
摘    要:建立了一种快速、灵敏且高精度的流动注射-分光光度法用于研究天然产物对酪氨酸酶活性的影响。此方法基于一定介质条件下L-3,4-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)在酪氨酸酶的作用下,发生氧化生成棕褐色多巴醌,其最大吸收峰位于475 nm处,而酪氨酸酶抑制剂能降低酶促反应速度,减少多巴醌形成的量,从而降低475 nm下的吸光度值,形成倒峰。在优化实验条件下,半抑制浓度的曲酸抑制酪氨酸酶活性测定相对标准偏差(n=10)为0.036%,与分光光度法和酶标仪微量法相比,精密度提高了10倍以上。咖啡酸对酪氨酸酶有较强的激活作用,对二酚酶相对激活率达到50%时的浓度(IC50)为0.170 mmol/L;薰衣草花水相提取物具有较强的抑制活性,其IC50值为0.96 mg/m L。与分光光度法及酶标仪微量法相比,流动注射-分光光度法精密度高,重复性好,适用于天然产物对酪氨酸酶活性影响的测定。

关 键 词:流动注射-分光光度法  天然产物  酪氨酸酶活性

Determination of Effect of Natural Products on Tyrosinase Activity by Flow Injection-Spectrophotometric Assay
LUO Bi,LI Guo-zhu,WANG Li-jun,MENG Qing-yan,LU Ya-ling,LIU Wen-jie. Determination of Effect of Natural Products on Tyrosinase Activity by Flow Injection-Spectrophotometric Assay[J]. Journal of Instrumental Analysis, 2015, 34(4): 407-413
Authors:LUO Bi  LI Guo-zhu  WANG Li-jun  MENG Qing-yan  LU Ya-ling  LIU Wen-jie
Abstract:
Keywords:flow injection-spectrophotometric approach  natural products  tyrosinase activity
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