| 红莲型杂交水稻细菌双杂交系统文库的构建 |
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| 引用本文： | 王坤,胡骏,彭晓珏,李绍清,朱英国.红莲型杂交水稻细菌双杂交系统文库的构建[J].武汉大学学报(理学版),2009,55(3). |
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| 作者姓名： | 王坤 胡骏 彭晓珏 李绍清 朱英国 |
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| 作者单位： | 武汉大学,生命科学学院,植物发育生物学教育部重点实验室,湖北,武汉,430072 |
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| 摘 要： | 用Trizol试剂提取红莲型水稻杂种F1幼穗的总RNA,分离纯化mRNA后反转录并合成双链cDNA.经Sephrose CL-2B凝胶过滤柱层析后,收集大于400 bp以上的双链cDNA片段,将其连接到pTRG载体上,转化到XL1-Blue MRF'Kan感受态细胞后构建成红莲水稻幼穗细菌双杂交文库.经检测计算该原始文库容量为1.03×106pfu/mL,对随机挑取的100个克隆进行PCR鉴定显示重组率接近100%而且大于800 bp的插入片段达到97%.扩增后文库的容量达到1.05×1010pfu/mL.
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| 关 键 词： | 水稻 幼穗 细菌双杂交系统 文库构建 |
Construction of Bacterial Two-Hybrid System Library from the Young Panicle of Honglian Hybrid Rice |
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| WANG Kun,HU Jun,PENG Xiao-jue,LI Shao-qing,ZHU Ying-guo.Construction of Bacterial Two-Hybrid System Library from the Young Panicle of Honglian Hybrid Rice[J].JOurnal of Wuhan University:Natural Science Edition,2009,55(3). |
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| Authors: | WANG Kun HU Jun PENG Xiao-jue LI Shao-qing ZHU Ying-guo |
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