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甘肃腐霉新记录种Pythium carolinianum的分离鉴定及rDNA-ITS序列分析
引用本文:李金花,柴兆祥.甘肃腐霉新记录种Pythium carolinianum的分离鉴定及rDNA-ITS序列分析[J].兰州大学学报(自然科学版),2010,46(6).
作者姓名:李金花  柴兆祥
基金项目:甘肃省科学事业费项目,甘肃省中药材产业科技攻关项目,甘肃省教育厅项目,甘肃农业大学科技创新基金,国家科技支撑计划项目
摘    要:将诱饵法与组织分离法相结合,对甘肃中部干旱地区菜豆根围土壤中的腐霉菌进行分离,共得到6株腐霉菌株.通过挑单菌丝的方法获得纯培养菌系,在对纯化菌株形态特征、培养特性、生长速度和温度的适应范围研究的基础上,对编号为18-51 D的腐霉菌株培养后提取DNA,采用真核生物核糖体基因(rDNA)转录间隔区(ITS)通用引物ITS1(5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′)和ITS4(5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)进行PCR扩增;扩增产物直接测序并输出全序列,获得947 bp的序列;将该序列在GenBank中进行比对,用DNAStar分析软件将同源性较高的登记菌株的序列与18-51D腐霉菌株用邻接法构建系统发育树,结果发现18-51 D与菌株DQ211524(Pythium carolinianum)和AY987038(P.carolinianum)聚为一类.依据形态学特征和分子鉴定,将这6株腐霉菌株鉴定为卡地腐霉P.carolinia num.这是第一次在菜豆根围土壤和在甘肃分离到卡地腐霉P.carolinianum,为甘肃腐霉新记录种.用平皿法测定该菌种对三科九种栽培植物的致病性,发现所有供试植物的胚根仅部分有轻微褐变,未见对生长有明显影响,说明P.carolinianum对这些植物基本无致病性.

关 键 词:菜豆  根围土壤  卡地腐霉  核糖体DNA-ITS  新记录

A new record of Pythium carolinianum in Gansu province and its isolation,identification and rDNA-ITS sequence analysis
LI Jin-hua,CHAI Zhao-xiang.A new record of Pythium carolinianum in Gansu province and its isolation,identification and rDNA-ITS sequence analysis[J].Journal of Lanzhou University(Natural Science),2010,46(6).
Authors:LI Jin-hua  CHAI Zhao-xiang
Abstract:
Keywords:
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