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杀鲑气单胞菌溶血素和菌毛蛋白的重组表达及其免疫保护效果研究
引用本文:李乐,刁菁,于晓清,王晓璐,王友红,叶海斌,吴海一.杀鲑气单胞菌溶血素和菌毛蛋白的重组表达及其免疫保护效果研究[J].广西科学院学报,2021,37(2):101-108.
作者姓名:李乐  刁菁  于晓清  王晓璐  王友红  叶海斌  吴海一
作者单位:山东省海洋科学研究院, 山东省海水养殖病害防治重点实验室, 山东青岛 266104
基金项目:山东省重点研发计划(2018GHY115033)和山东省良种工程项目(2019LZGC020)资助。
摘    要:为探究杀鲑气单胞菌溶血素和菌毛蛋白能否作为亚单位疫苗候选抗原,本研究针对前期分离的杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种(Aeromonas salmonicida subsp.masoucida, ASM),利用原核表达系统对其进行重组表达,免疫虹鳟后检测其免疫保护效果与诱导的免疫应答特征。Western-blotting结果显示,虹鳟抗灭活ASM血清可与2种重组蛋白发生阳性反应,说明其具有较好的免疫原性。免疫保护实验结果显示,重组溶血素、重组菌毛蛋白及两者混合物免疫对虹鳟的相对免疫保护率(Relative Percentage Survival, RPS)分别为64.6%、37.5%和75.0%;ELISA检测发现,重组溶血素和重组菌毛蛋白单独免疫以及两者混合免疫均能有效诱导虹鳟产生抗各抗原的特异性抗体,在免疫2周后特异性抗体水平均显著高于对照组(P0.05),其中混合免疫组虹鳟血清中抗重组溶血素抗体水平显著高于重组溶血素单独免疫组,但其诱导产生的抗重组菌毛蛋白抗体水平与重组菌毛蛋白单独免疫组无显著性差异;荧光定量PCR检测结果显示,3个免疫组中IL-6、IL-8、TCR及CD4基因的表达水平均显著高于PBS对照组,其中重组溶血素与重组菌毛蛋白共免疫组中IL-6、CD4、MHC-Ⅱ及IgM基因表达水平显著高于其他免疫组。研究结果表明,重组溶血素对虹鳟具有较好的免疫保护效果,且提示重组菌毛蛋白具有开发成为佐剂分子的潜在价值,该结果可为杀鲑气单胞菌亚单位疫苗的研制及应用提供了重要参考。

关 键 词:杀鲑气单胞菌  重组表达  溶血素  菌毛蛋白  免疫保护  虹鳟
收稿时间:2021/5/10 0:00:00

Study on the Immune Protective Effects of Recombinant Hemolysin and Pilin Against Aeromonas salmonicida
LI Le,DIAO Jing,YU Xiaoqing,WANG Xiaolu,WANG Youhong,YE Haibin,WU Haiyi.Study on the Immune Protective Effects of Recombinant Hemolysin and Pilin Against Aeromonas salmonicida[J].Journal of Guangxi Academy of Sciences,2021,37(2):101-108.
Authors:LI Le  DIAO Jing  YU Xiaoqing  WANG Xiaolu  WANG Youhong  YE Haibin  WU Haiyi
Institution:Shandong Key Laboratory of Disease Control in Mariculture, Marine Science Research Institute of Shandong Province, Qingdao, Shandong, 266104, China
Abstract:
Keywords:Aeromonas salmonicida  recombinant expression  hemolysin  pilin  immune protection  rainbow trout
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