费尔干猪毛菜液泡膜氢离子焦磷酸酶基因SfVP的克隆、序列分析及表达 |
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作者姓名: | 贺怡, 钱雯婕, 袁磊, 李榕, 谭兰, 谢全亮, 李鸿彬 |
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作者单位: | [1]石河子大学生命科学学院,石河子832003; [2]石河子大学农业生物技术重点实验室,石河子832003 |
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基金项目: | 新疆兵团种质资源创新专项(2012BB050); 石河子大学创新团队项目(2011ZRKXTD-0603); 石河子大学SRP项目(SRP20130068) |
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摘 要: | 植物液泡膜氢离子焦磷酸酶(Vacuolar H+-PPase,VP)能够酸化液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性方面发挥着着重要作用。本研究采用RT-PCR结合RACE方法,从费尔干猪毛菜中(Salsola ferganica)克隆得到液泡膜质子焦磷酸酶基因SfVP,该基因的cDNA全长2738 bp,包含1个2301 bp的完整开放读码框(ORF),编码766个氨基酸的多肽。氨基酸序列分析表明其属于H+-转运无机焦磷酸酶超家族成员,具有典型的H+-PPase结构域,其疏水性较强,含有12个跨膜螺旋结构。SfVP序列比对显示具有H+-PPase的3个保守序列CS1、CS2和CS3,其中CS1中含有保守的底物催化位点,与烟草的NtVP氨基酸序列相似性为95.3%。半定量RT-PCR结果表明,SfVP的转录表达丰度随着600 mmol/L NaCl处理时间的增加而升高,处理12 h后显著增加并一直维持在较高水平。
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关 键 词: | 费尔干猪毛菜 液泡膜氢离子焦磷酸酶 RACE 盐响应表达 |
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