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时间分辨荧光免疫分析高灵敏检测嗜水气单胞菌
引用本文:林鹏,卢洁,郭松林,冯建军,王艺磊,陈锦民. 时间分辨荧光免疫分析高灵敏检测嗜水气单胞菌[J]. 化学学报, 2017, 75(4): 398-402. DOI: 10.6023/A16110619
作者姓名:林鹏  卢洁  郭松林  冯建军  王艺磊  陈锦民
作者单位:集美大学水产学院 农业部东海海水健康养殖重点实验室 厦门 361021
基金项目:项目受国家自然科学基金(No.31272685)资助.
摘    要:建立了生物素-链霉亲和素时间分辨荧光免疫分析(BAS-TRFIA)高灵敏检测嗜水气单胞菌的新方法.以兔抗IgG包被微孔板,加入嗜水气单胞菌菌株B18和生物素化IgG,生成的夹心复合物用Eu3+-链霉亲和素作为示踪物,Eu3+可与离解增强液形成时间分辨荧光(TRF),通过TRF值对病原菌定量.方法的检测限为1.0×102 cfu/mL,在1.0×10~1.0×106 cfu/mL范围内线性良好,相关系数0.9716.用该法检测时,不同来源的嗜水气单胞菌以及其它气单胞菌均呈阴性.板内和板间的变异系数分别小于5.00%和9.00%.所有相关检测试剂37℃恒温放置6 d后,检测性能无明显改变.对60份人工感染的美洲鳗鲡组织样品,包括肝、肾、肠、鳃和肌肉等组织进行检测,阳性检测率为98.33%.结果表明,BAS-TRFIA法检测嗜水气单胞菌,灵敏度高、特异性好、操作简便,该方法为水产养殖病原菌检测提供了新的思路.

关 键 词:时间分辨荧光免疫分析  嗜水气单胞菌  生物素-亲和素系统  美洲鳗鲡  水产养殖  

Sensitive Detection of Aeromonas Hydrophila by Time-Resolved Fluorimmunoassay
Lin Peng,Lu Jie,Guo Songlin,Feng Jianjun,Wang Yilei,Chen Jinmin. Sensitive Detection of Aeromonas Hydrophila by Time-Resolved Fluorimmunoassay[J]. Acta Chimica Sinica, 2017, 75(4): 398-402. DOI: 10.6023/A16110619
Authors:Lin Peng  Lu Jie  Guo Songlin  Feng Jianjun  Wang Yilei  Chen Jinmin
Affiliation:Fisheries College, Jimei University, Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea, Ministry of Agriculture, Xiamen 361021
Abstract:
Keywords:time-resolved fluorimmunoassay  Aeromonas hydrophila  biotin-avidin system  Anguilla rostrata  aquaculture  
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