|
|||||
|
|
| 酵母同步细胞的Percoll连续密度梯度改良方法分离及其单细胞拉曼光谱鉴别 | |
| 引用本文： | 黄庶识,赖钧灼,卢明倩,程琴,廖威,陈丽梅.酵母同步细胞的Percoll连续密度梯度改良方法分离及其单细胞拉曼光谱鉴别[J].光谱学与光谱分析,2015,35(8):2170-2175. |
| 作者姓名： | 黄庶识 赖钧灼 卢明倩 程琴 廖威 陈丽梅 |
| 作者单位： | 1. 昆明理工大学环境科学与工程学院，云南 呈贡 650500 2. 广西科学院生物物理实验室，广西 南宁 530007 3. 广东文理职业学院，广东 湛江 524400 4. 广西亚热带作物研究所，广西 南宁 530001 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，广西科学院基金项目 |
| 摘 要： | 利用改良后的Percoll连续密度梯度分离方法，分离不同酵母菌株稳定期的同步细胞，并在单细胞水平上，应用激光光镊拉曼光谱对分离的同步细胞进行鉴别。采用高速离心机角式转头和2 mL聚丙烯离心管，20 ℃，19 320 g离心15 min，将大约1.75 mL Percoll溶液形成1.00～1.31 g·mL-1连续密度梯度;将样品均匀铺加在离心管连续密度梯度液顶层，20 ℃，400 g离心60 min，酵母分成明显的2层细胞带;微分干涉差显微镜（DIC）、相差显微镜以及同步生长曲线分析显示，下层酵母细胞以单个细胞为主，大小均匀、致密，折光性强，生长呈现阶梯式增长，具有同步细胞生长的特性，确定其为同步的G0细胞。利用单细胞光镊拉曼光谱系统对所分离的G0同步细胞与非G0细胞进行分析，结果显示G0同步细胞和非G0细胞的特征峰位置基本一致，但G0细胞对应的蛋白质、糖类、核酸等生物大分子特征峰强度大于非G0细胞，说明G0细胞大分子物质含量要比非G0细胞的高;对G0细胞和非G0细胞进行主成分分析，结果显示，分离的同步化G0细胞之间成分含量差异少，比较均一，而非同步细胞之间内含物质差异大，呈不均一性，说明单细胞光镊拉曼光谱系统可以鉴别同步和非同步细胞。改良后的Percoll连续密度梯度分离方法，能够分离多数酵母菌株同步化细胞，是一种易操作、成本低、效率高的细胞分离方法。 |
| 关 键 词： | 酵母 Percoll密度梯度离心 同步细胞 拉曼光谱 |
| 收稿时间： | 2014-06-11 |
A Modified Procedure to Isolate Synchronous Cells from Yyeasts with Continuous Percoll Density Gradient and Their Raman Discri Mination |
|
| HUANG Shu-shi,LAI Jun-zhuo,LU Ming-qian,CHENG Qin,LIAO Wei,CHEN Li-mei.A Modified Procedure to Isolate Synchronous Cells from Yyeasts with Continuous Percoll Density Gradient and Their Raman Discri Mination[J].Spectroscopy and Spectral Analysis,2015,35(8):2170-2175. | |
| Authors: | HUANG Shu-shi LAI Jun-zhuo LU Ming-qian CHENG Qin LIAO Wei CHEN Li-mei |
| Institution: | 1. Faculty of Environmental Science and Engineering, Kunming University of Science and Technology, Chenggong 650500, China2. Lab of Biophysics, Guangxi Academy of Sciences, Nanning 530007, China3. Guangdong Institute of Arts Sciences, Zhanjiang 524400, China4. Guangxi Subtropical Crops Research Institute, Nanning 530001, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Yeast Percoll density gradient centrifugation Synchronous cells Raman spectrum |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |
| 点击此处可从《光谱学与光谱分析》浏览原始摘要信息 | |
| 点击此处可从《光谱学与光谱分析》下载免费的PDF全文 | |