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化学与酶促相结合合成并克隆核糖体失活蛋白Gelonin基因
引用本文:李卓玉,石亚伟,袁静明,Wise J.G,Trommer W.E. 化学与酶促相结合合成并克隆核糖体失活蛋白Gelonin基因[J]. 高等学校化学学报, 2002, 23(3): 394-398
作者姓名:李卓玉  石亚伟  袁静明  Wise J.G  Trommer W.E
作者单位:山西大学生物工程中心,太原,030006;Kaiserslautern 大学化学系,Kaiserslautern 67653,德国
基金项目:德国教育、科学技术部国际合作局资助
摘    要:利用已知Gelonin的氨基酸序,逆向推算出整个基因的碱基序列,根据E.coli的密码子偏爱性和后续基因克隆的需要,通过沉默突变设计相应的酶切位点和碱基序列,将整个基因分为四段,每个片段约175-220pb,每一个片段中的互补链从5′末端用化学合成100-120的碱基单链,其中两个链的3′末端有20个互补碱基。利用T4DNA聚合酶酶促添补成双链DNA,用分子克隆技术,分别构建重组子,然后再构建成含整个Gelonin基因的表达载体pET-gel进行表面,经诱导后,获得了一个28000的重组蛋白,并主要以可溶形式存在。

关 键 词:核糖体失活蛋白  Gelonin  基因化学合成  重组子  表达
文章编号:0251-0790(2002)03-0394-05

Synthesis and Clone of Ribosome Inactivating Protein-Gelonin Gene by the Combination of Chemical and Enzymatic Method
Wise J.G,Trommer W.E. Synthesis and Clone of Ribosome Inactivating Protein-Gelonin Gene by the Combination of Chemical and Enzymatic Method[J]. Chemical Research In Chinese Universities, 2002, 23(3): 394-398
Authors:Wise J.G  Trommer W.E
Abstract:
Keywords:Ribosome inactivating proteins  Gelonin  Chemical synthesis of gene  Recombinant  Expression
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