毛细管电泳-激光诱导荧光法检测HSP70-2基因多态性研究 |
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引用本文: | 阮佳,李永儒,孙成均,周琛,李永新.毛细管电泳-激光诱导荧光法检测HSP70-2基因多态性研究[J].分析试验室,2014(10):1135-1138. |
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作者姓名: | 阮佳 李永儒 孙成均 周琛 李永新 |
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作者单位: | 四川大学华西公共卫生学院; |
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基金项目: | 国家自然科学基金(青年基金)项目(81102162);四川大学青年教师启动基金项目(2010SCU11013)资助 |
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摘 要: | 建立了HSP70-2基因多态性的毛细管电泳-激光诱导荧光(CE-LIF)检测方法。采用试剂盒法提取人血清标本中全基因组DNA作为模板,选择特异引物进行PCR扩增反应,产物用Pst I限制性内切酶酶切;酶切产物用高灵敏度的SYBR Gold荧光染料标记后,用毛细管电泳-激光诱导荧光法检测。在优化的毛细管电泳-激光诱导荧光条件下,酶切产物在25 min内即可完成检测。GeneRular 100bp DNA ladder在同一天内连续测定6次,迁移时间和峰面积的RSD分别为1.8%~2.9%和2.8%~7.9%;连续6日测定迁移时间与峰面积的RSD分别为2.1%~4.3%和3.5%~9.3%。本研究共检测200份样品,其中G/G分型3份,A/G分型25份,A/A分型172份,检测结果与凝胶电泳结果一致。CE-LIF检测方法具有电泳时间短、试样消耗少、绿色环保等优点,能用于HSP70-2基因多态性的检测。
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关 键 词: | HSP70-2基因 基因多态性检测 毛细管电泳-激光诱导荧光检测 |
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