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tPA Kringle-2结构域基因的合成及其在大肠杆菌中表达
作者姓名:华子春  付和亮  陈于红  余瑞荣  王进  朱德煦
作者单位:南京大学生物化学系,南京大学生物化学系,南京大学生物化学系,南京大学生物化学系,南京大学生物化学系,南京大学生物化学系 南京 210008,南京 210008,南京 210008,南京 210008,南京 210008,南京 210008
基金项目:国家“863”高科技资助项目
摘    要:本文用固相磷酸三酯法合成了组织型纤溶酶原激活剂(tPA)174-262片段(Kringle-2结构域)对应的DNA序列。利用PIN Ⅲ OmpA2表达质粒的信号序列和Plpp-lac启动子在大肠杆菌中表达了tPA Kringle-2。约2/3的表达产物分泌在大肠杆菌的周间质中。经硫酸铵盐析,Lysine-Sepharose亲和层析和FPLC-MONOQ离子交换层析等3步纯化后其氨基酸组成和tPA 174-262片段的组成一致。放射结合分析证明重组表达的tPA Kringle-2具有纤维蛋白结合活性。

关 键 词:组织型纤溶酶原激活剂(tPA)  环饼结构域
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