| 金黄色葡萄球菌SarA蛋白原核表达及免疫原性研究 |
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| 引用本文： | 程旭,杨雨晴,吴赛男,侯勤龙,李咏梅,韩慧明.金黄色葡萄球菌SarA蛋白原核表达及免疫原性研究[J].北华大学学报(自然科学版),2021,22(1):47-52. |
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| 作者姓名： | 程旭 杨雨晴 吴赛男 侯勤龙 李咏梅 韩慧明 |
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| 作者单位： | 北华大学基础医学院,吉林 吉林 132013;北华大学基础医学院,吉林 吉林 132013;北华大学基础医学院,吉林 吉林 132013;北华大学基础医学院,吉林 吉林 132013;北华大学基础医学院感染与免疫研究中心,吉林 吉林 132013;北华大学基础医学院,吉林 吉林 132013;北华大学基础医学院感染与免疫研究中心,吉林 吉林 132013;北华大学基础医学院,吉林 吉林 132013;北华大学基础医学院感染与免疫研究中心,吉林 吉林 132013 |
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| 基金项目： | 吉林省科技发展计划项目;北华大学研究生创新项目;北华大学大学生创新创业训练项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建SarA的原核表达载体,对SarA蛋白免疫原性进行初步研究.方法 首先应用生物信息学方法 对SarA基因进行分析;以金黄色葡萄球菌基因组为模板,通过PCR扩增、酶切、连接等一系列反应进行原核重组质粒的构建;IPTG诱导原核重组质粒表达,对SarA蛋白进行纯化、浓缩,将浓缩后的蛋白与佐剂混合免疫家兔,收集血清,通过间接ELISA法检测血清抗体效价,并通过Western blot鉴定抗体特异性.结果 成功构建重组表达质粒SarA-pET32a(+),通过IPTG诱导表达,获得以可溶形式高效表达的SarA蛋白,分子质量约为32 kDa.用纯化的SarA蛋白免疫家兔,获得了SarA多克隆抗体,其效价为1:512000.结论 成功构建了SarA原核表达载体,且在大肠杆菌细胞中表达;得到了高效价和良好特异性的多克隆血清抗体,为进一步研究抗细菌生物膜疫苗奠定了基础.
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| 关 键 词： | SarA 原核表达 免疫原性 |
Prokaryotic Expression and Immunogenicity of SarA Protein from Staphylococcus aureus |
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| CHENG Xu,YANG Yuqing,WU Sainan,HOU Qinlong,LI Yongmei,HAN Huiming.Prokaryotic Expression and Immunogenicity of SarA Protein from Staphylococcus aureus[J].Journal of Beihua University(Natural Science),2021,22(1):47-52. |
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| Authors: | CHENG Xu YANG Yuqing WU Sainan HOU Qinlong LI Yongmei HAN Huiming |
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