| 锤头状Ribozyme在修饰核苷酸ψ3′侧的定点剪切 |
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| 引用本文： | 吴晨衍,金由辛,王德宝.锤头状Ribozyme在修饰核苷酸ψ3′侧的定点剪切[J].中国科学B辑,1993(12). |
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| 作者姓名： | 吴晨衍 金由辛 王德宝 |
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| 作者单位： | 中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室，中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室，中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室 上海 200031，上海 200031，上海 200031 |
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| 基金项目： | 国家“863”高科技，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 现有知识所知道的锤头状Ribozyme结构中,剪切是在特殊位点的3′侧发生,我们将含GTΨ的酵母丙氨酸tRNA 3′半分子(40聚)作为底物,按Haseloff-Gerlach锤头结构模型设计了一个38聚的Ribozyme分子。在镁离子存在的条件下,GTΨ的3′侧发生预期的体外剪切反应。反应的米氏动力学参数为:K_m:6.7μmol/L,k_(cat):3.4×10~(-3)/min。与此同时,合成了一个17聚的底物类似物,仅以GUU代替上述的GTΨ序列。恒态动力学分析表明,两底物的K_m值大致相同,但k_(cat)值相差达294倍。实验表明,修饰核苷酸Ψ可以是Ribozyme锤头结构中的剪切位点,但具有很低的k_(cat)。
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| 关 键 词： | 锤头结构 Ribozyme 修饰核苷酸Ψ |
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