| 双功能试剂与螯合金属元素标记多肽新技术的建立 |
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| 引用本文： | 田慧芳,徐庆春,丁慧荣,田志华,张宏,朱华,王昕,沈靖.双功能试剂与螯合金属元素标记多肽新技术的建立[J].分析化学,2016(7):1022-1028. |
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| 作者姓名： | 田慧芳 徐庆春 丁慧荣 田志华 张宏 朱华 王昕 沈靖 |
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| 作者单位： | 1. 北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所中心实验室,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京100142;2. 北京中海康医药科技发展有限公司,北京,100082;3. 北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所核医学科,北京,100142;4. 中国人民解放军防化学院生化防护系,北京,102205 |
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| 基金项目： | 北京市自然科学基金(.7143172 |
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| 摘 要： | 建立了双功能试剂2-(4-异硫氰基苯基)甲基]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(p-SCN-Bn-DOTA)与标准肽段反应的新方法,测定了反应产物与镧系金属Eu(Ⅲ)的螯合效率,探索了其作为靶向探针和蛋白定量标记试剂性能.考察了不同缓冲体系的浓度及pH值、p-SCN-Bn-DOTA量与肽段相对量、反应体系中有机相与水相比例,反应温度与反应时间对偶联效率的影响.实验结果显示:p-SCN-Bn-DOTA量为肽段的32倍,缓冲体系为0.2 mol/L TEAB(pH 8.5),60℃反应60 min,有机相与水相之比为4.4∶1 (V/V)时标记效率高;在HCI/NaAc缓冲体系(pH 4.0)中60℃反应60 min,金属离子鳌合反应效率高达94％.本研究建立了一种新的基于双功能试剂p-SCN-Bn-DOTA的标记方法,并成功用于RGD肽等的标记.
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| 关 键 词： | 双功能试剂 标记 多肽 蛋白定量 质谱 |
New Peptide Labeling Technique Based on Bifunctional Reagent and Rare Earth Metal Chelating Tags |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bifunctional chelating reagents Labeling Peptide Protein quantification Mass spectrometry |
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