基于核酸适配体的荧光法检测水胺硫磷和丙溴磷 |
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引用本文: | 王丽,叶华,桑宏庆,王丹丹.基于核酸适配体的荧光法检测水胺硫磷和丙溴磷[J].分析化学,2016(5):799-803. |
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作者姓名: | 王丽 叶华 桑宏庆 王丹丹 |
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作者单位: | 安徽科技学院食品药品学院,凤阳,233100 |
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基金项目: | the National Natural Science Foundation of China(31201369),the Key Project of College Excellent Talents Support Plan in Anhui Province(gxyqZD2016219),the Natural Science Research Project of Anhui Science and Technology University (No.ZRC2014395).本文系国家自然科学基金项目(31201369),安徽省高校优秀人才支持计划重点项目(gxyqZD2016219),安徽科技学院自然科学研究项目(ZRC2014395) |
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摘 要: | 建立了基于适配体的农药水胺硫磷和丙溴磷的荧光检测方法.采用可特异性识别水胺硫磷和丙溴磷、且5 '端标记荧光基团FAM的核酸适配体(F-ssDNA),与3 '末端标记猝灭基团DABCYL的短链序列(Q-ssDNA)互补杂交形成双链结构,荧光基团的荧光被淬灭,荧光信号很弱;此时加入靶分子,特异性结合核酸适配体,引起互补短链序列从双链结构中解离,使适配体荧光信号增强,基于此可实现水胺硫磷、丙溴磷的定量检测.优化后的检测条件为:将终浓度为25 nmol/L F-ssDNA与50 nmol/L Q-ssDNA在25℃孵育20 min,使二者杂交形成双链适配体探针复合物,加入等体积的农药样品孵育60 min,然后检测体系的荧光信号变化值△I.在最佳条件下,△I与水胺硫磷和丙溴磷的浓度均在50~ 500 μmol/L范围内呈线性关系.水胺硫磷的检出限(LOD,3σ)为11.4 μmol/L,相对标准偏差(RSD)为5.8%(n=10);丙溴磷的检出限为14.0 μmol/L,RSD为4.9%(n=l0).用于实际水样中两种农药的检测,加标回收率为85.8% ~95.3%.
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关 键 词: | 核酸适配体 荧光 水胺硫磷 丙溴磷 |
Aptamer-based Fluorescence Assay for Detection of Isocarbophos and Profenofos |
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Abstract: | |
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Keywords: | Aptamer Fluorescence Isocarbophos Profenofos |
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