| 基于核酸外切酶Ⅰ的适配体荧光传感器检测人尿液中的Hg2+ |
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| 引用本文： | 赵秋伶,张尤华,于晓艳.基于核酸外切酶Ⅰ的适配体荧光传感器检测人尿液中的Hg2+[J].分析化学,2016(7):1099-1105. |
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| 作者姓名： | 赵秋伶 张尤华 于晓艳 |
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| 作者单位： | 辽宁工程技术大学矿业技术学院,葫芦岛,125105 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.21506087)资助 This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (21506087) |
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| 摘 要： | 基于富含胸腺嘧啶(T)DNA适配体对Hg2+的特异性识别和核酸外切酶I(Exo Ⅰ)辅助的信号转换策略,建立了快速检测人尿液中Hg2+的荧光分析方法.固定在微孔板上的DNA适配体特异识别Hg2+后,折叠成稳定的发卡型双链结构,不能被单链特异性的Exo Ⅰ水解,核酸染料SYBR GreenⅠ(SG)插入发卡部位产生荧光信号,基于此可实现Hg2+的定量检测.优化后的最佳实验条件为:微孔板包被亲和素浓度为50 mg/L;检测DNA包被浓度为75 nmol/L;使用5×SG以及1.2 μL的Exo Ⅰ.在最佳实验条件下,体系荧光强度与Hg2+浓度的对数呈良好线性关系,线性范围为2～500 nmol/L,检出限为1.5 nmoL/L(3σ).利用本方法检测尿样中的Hg2+,加标回收率为91.2％ ～ 95.0％,相对标准偏差(n=5)为2.1％ ～4.6％.本方法选择性良好,操作简单,用HNO3-KMnO4溶液将尿液中其它形式的汞氧化为Hg2+后,成功实现了尿液中总汞含量的检测.
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| 关 键 词： | DNA识别 核酸外切酶Ⅰ 汞离子 信号放大 荧光分析 |
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