高性能胰蛋白酶分子表面印迹材料的制备及其大分子识别特性研究

以交联聚乙烯醇(CPVA)微球为基质,以甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,在中性水介质中制备了高性能胰蛋白酶(TRY)大分子表面印迹材料。首先通过CPVA微球表面的羟基与甲基丙烯酰氯之间的酯化反应,将大量可聚合双键甲基丙烯酰基(MAO)引入微球表面,获得改性微球MAO-CPVA。在中性水溶液中,单体MAA的羧基几乎发生完全电离,凭借强烈的静电相互作用,MAA自动结合在碱性蛋白TRY大分子周围,形成单体-模板复合体。水溶液中过硫酸铵/亚硫酸氢钠引发体系所产生的自由剂,使包围在TRY周围的单体MAA与交联剂N,N'-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)在微球MAO-CPVA表面发生接枝交联聚合,而模板TRY则被包裹在交联网络之中,除去模板后便得到了TRY表面印迹微球MIP-PMAA/CPVA。深入考察了该表面印迹微球的大分子识别性能。研究结果表明,表面印迹微球MIP-PMAA/CPVA对TRY具有优良的结合亲和性,结合容量高达84mg·g~(-1)(3.6μmol·g~(-1));对模板蛋白TRY具有特异的识别选择性,相对于另一种碱性蛋白木瓜蛋白酶,印迹微球对TRY的选择性系数高达21.62。