| 重组羧肽酶原B的体外变复性研究 |
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| 引用本文： | 张晓彦,李素霞,顾俊杰,袁勤生.重组羧肽酶原B的体外变复性研究[J].分子科学学报,2005,21(4):51-57. |
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| 作者姓名： | 张晓彦 李素霞 顾俊杰 袁勤生 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237 |
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| 摘 要： | 重组羧肽酶原B在大肠杆菌中过量表达时形成包涵体，需要经过体外交复性后才能获得生物活性．为了提高羧肽酶原B的复性效率，首先对包涵体的溶解条件进行了优化．对比了极端pH条件、各种变性剂和一些表面活性剂对包涵体的溶解效果；并且在较弱的碱性条件下得到了很好的包涵体溶解效果．接着，通过对缓冲液中蛋白浓度、PH值、温度、氧化还原对（GSH：GSSG）比值的定量分析，确定了复性液的基本成分；比较了不同浓度的尿素对防止聚集、提高复性效率的影响；另外还对比了加样方式的影响，最终确定了重组羧肽酶原B体外复性的最佳条件，即20mmol／L Tris—HCl，pH=9．5，150μg／mL Pro—CPB concentration，1mmol／L GSH，0．5mol／L urea．复性效率比最初提高了3倍左右．
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| 关 键 词： | 重组羧肽酶原B 变性 复性 |
| 文章编号： | 1000-9035(2005)04-0051-07 |
| 收稿时间： | 04 22 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 2005年4月22日 |
Research on denatutation and renaturation of recombinant pro-Carboxypeptidase B expressed from Escherichia coli |
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| ZHANG Xiao-yan,Li Su-xia,GU Jun-jie,YUAN Qin-sheng.Research on denatutation and renaturation of recombinant pro-Carboxypeptidase B expressed from Escherichia coli[J].Journal of Molecular Science,2005,21(4):51-57. |
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| Authors: | ZHANG Xiao-yan Li Su-xia GU Jun-jie YUAN Qin-sheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pro-Carboxypeptidase B denaturation renaturation |
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