| 停乳链球菌ISP基因的克隆与表达及其免疫原性研究 |
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| 引用本文： | 李月颖,朱松,剧慧栋,刘文青,赵宝华,裴艳涛.停乳链球菌ISP基因的克隆与表达及其免疫原性研究[J].河北师范大学学报(自然科学版),2015(2):158-164. |
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| 作者姓名： | 李月颖 朱松 剧慧栋 刘文青 赵宝华 裴艳涛 |
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| 作者单位： | 河北师范大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 河北省重大科技攻关项目(11230405D);河北省高等学校科学技术研究项目(QN2014199) |
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| 摘 要： | 根据GenBank报道的停乳链球菌免疫分泌蛋白基因(immunogenic secreted protein,ISP)序列设计引物,PCR扩增得到1 550bp的isp片段,其基因序列与GenBank提交序列的同源性为98.13%.将isp基因与表达载体pET-25b(+)连接,成功构建重组质粒pET-25b(+)-isp.转化大肠杆菌BL21(DE3),成功得到阳性表达重组菌株BL21(pET-25b(+)-isp).经IPTG诱导后,SDS-PAGE与Western blot检测得到约55ku的目的蛋白.经优化确定,isp蛋白的最优表达条件:1mmol/L IPTG,37℃诱导18h,且此时表达的蛋白具有良好的抗原性.该研究制备了奶牛乳房炎停乳链球菌的基因工程疫苗,并对其免疫原性进行了探究,为奶牛乳房炎的免疫防治奠定了基础.
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| 关 键 词： | 奶牛乳房炎 停乳链球菌 isp基因 基因工程疫苗 免疫原性 |
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