| 单细胞激光拉曼光谱检测重组大肠杆菌细胞表达甲酸脱氢酶 |
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| 引用本文： | 卢明倩,董蓉,温顺华,张韦,王巧贞,黄庶识,陈丽梅. 单细胞激光拉曼光谱检测重组大肠杆菌细胞表达甲酸脱氢酶[J]. 分析化学, 2012, 0(12): 1845-1851 |
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| 作者姓名： | 卢明倩 董蓉 温顺华 张韦 王巧贞 黄庶识 陈丽梅 |
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| 作者单位： | 昆明理工大学生物工程技术研究中心;广西科学院生物物理实验室;广西师范大学生命科学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30970263)资助项目 |
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| 摘 要： | 甲酸脱氢酶(FDH,EC1.2.1.2)在工业生产中有重要的应用价值,工业上应用的FDH可以通过构建高水平表达重组FDH蛋白的基因工程菌生产,用分子生物学的方法检测重组蛋白的高效表达和积累操作繁杂,耗时耗力且需要破碎细胞。为了寻找一种简单快速,不需破碎细胞,且能实时检测FDH重组蛋白在基因工程菌中表达情况的方法,本研究应用单细胞激光拉曼光谱分析技术(LTRS),研究IPTG诱导不同时间后甲酸脱氢酶重组蛋白(FDH)在大肠杆菌细胞中的表达水平。结果表明,FDH的特征峰1004,1355,1455和1667cm-1随着IPTG诱导时间的延长而增强,说明在诱导培养过程中FDH重组蛋白在重组大肠杆菌细胞中表达并积累,这4个峰强的增加值所反映的FDH表达量与SDS-PAGE电泳分析结果一致。实验结果证明,LTRS是快速有效检测单个大肠杆菌活细胞体内重组FDH实时表达的一种非入侵方法。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 甲酸脱氢酶 重组蛋白表达 单细胞 拉曼光谱 |
Detection of Recombinant Protein Expression of Formate Dehydrogenase in Single Living Escherichia Coli Cell by Laser Tweezers Raman Spectroscopy |
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| LU Ming-Qian,DONG Rong,WEN Shun-Hua,ZHANG Wei,WANG Qiao-Zhen,HUANG Shu-Shi,CHEN Li-Mei. Detection of Recombinant Protein Expression of Formate Dehydrogenase in Single Living Escherichia Coli Cell by Laser Tweezers Raman Spectroscopy[J]. Chinese Journal of Analytical Chemistry, 2012, 0(12): 1845-1851 |
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| Authors: | LU Ming-Qian DONG Rong WEN Shun-Hua ZHANG Wei WANG Qiao-Zhen HUANG Shu-Shi CHEN Li-Mei |
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| Affiliation: | 1 1(Biotechnology Research Center,Kunming University of Science and Technology,Kunming 650500,China) 2(Lab of Biophysics,Guang xi Academy of Sciences,Nanning 530007,China) 3(College of Life Science,Guangxi Normal University,Guilin 541004,China) |
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| Abstract: | |
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