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荒漠植物中总脱氧核糖核酸分子的提取方法
作者姓名:赵昕  张继伟  陈国雄  李玉霖
作者单位:中国科学院 西北生态环境资源研究院 甘肃省寒区旱区逆境生理与生态重点实验室, 甘肃 兰州 730000
基金项目:中国科学院仪器设备功能开发技术创新项目、国家重点研发计划(2016YFC0500907)资助
摘    要:建立了荒漠植物总脱氧核糖核酸分子(DNA)的提取方法.荒漠植物叶片加少量交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP粉末)研磨三次以上,得到样品超细粉末.样品粉末迅速加入前处理缓冲液,混匀后低速离心,弃上清留下沉淀物,在沉淀物中加入等体积预热的提取裂解液,混匀后60~70℃温浴1 h.高速离心提取上清液加入纯化液混匀、抽提、离心.再次提取混合液上清,加入预冷的异丙醇,-18℃沉淀DNA 0.5 h以上,异丙醇溶液高速离心,取沉淀用75%乙醇清洗两遍,晾干,加入超纯水溶解.方法具有操作简单和耗时少等优点,操作过程大约2~3 h.DNA损失少,产量高于500 ng/μL.方法提取主要荒漠植物叶片DNA纯度高、完整性好,具有广泛适用性.

关 键 词:荒漠植物   总脱氧核糖核酸分子   提取
收稿时间:2019-11-14
修稿时间:2020-01-10
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