基于链置换循环无标记检测端立酶RNA的荧光法 |
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引用本文: | 张霞菲,成锐,时志路,金燕. 基于链置换循环无标记检测端立酶RNA的荧光法[J]. 高等学校化学学报, 2016, 0(1): 12-18. DOI: 10.7503/cjcu20150524 |
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作者姓名: | 张霞菲 成锐 时志路 金燕 |
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作者单位: | 陕西师范大学化学化工学院,陕西省生命分析重点实验室,陕西710062 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(21075079;21375086),陕西省创新团队研究计划项目(2014KCT-28),陕西师范大学中央高校基金项目(GK261001097),长江学者高校创新团队项目(批准号:IRT-14R33)资助.Supported by the National Natural Science Foundation of China(.21075079 |
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摘 要: | 以氧化石墨烯(GO)作为DNA载体和荧光猝灭剂,SYBRGreen Ⅰ(SGⅠ)为荧光信号探针,发夹核酸探针为分子识别探针,基于目标物启动的发夹核酸探针链置换循环反应,建立了一种利用荧光共振能量转移和链置换循环放大技术检测端粒酶RNA (hTR)的荧光新方法.发夹核酸探针hpDNA1和hpDNA2吸附在GO表面,嵌插在发夹DNA探针茎部的SG Ⅰ的荧光信号被GO猝灭.当人工合成的目标物(T1)存在时,T1与hpDNA1杂交打开hpDNA1的茎-环结构而引发hpDNA2与T1之间的链置换循环反应,由此累积产生大量的hpDNA1/hpDNA2杂交双链.刚性的双链DNA脱离GO表面,导致所嵌插的SG Ⅰ产生较强的荧光信号.基于荧光信号的变化,可定量检测0.2~50 nmoL/L的T1,检出限为90 pmol/L.该方法为端粒酶RNA检测提供了一种高灵敏、高特异性且无需标记的荧光新途径.
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关 键 词: | 端粒酶RNA 链置换循环 荧光共振能量转移 无标记 |
Label-free Fluorescence Assay of Telomerase RNA Based on Strand Displacement Amplification |
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Abstract: | |
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Keywords: | Telomerase RNA Strand displacement amplification Fluorescence resonance energy transfer Label-free |
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