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卡那霉素A酶联适配体检测方法研究
作者姓名:刘信嘉  江颖妍  李美英  王弘  刘英菊  卢蓝蓝  孙远明  雷红涛
作者单位:广东省食品质量安全重点实验室/农业部农产品贮藏质量安全风险评价重点实验室;华南农业大学理学院生物材料研究所
基金项目:行业公益(农业)项目(No.201003008-08);国家重大基础研究项目(No.2012CB720803);国家自然科学基金项目(No.21105030);广东省科技计划项目(No.2012A020100002)资助
摘    要:通过EDC法偶联辣根过氧化物酶(HRP)和卡那霉素A(Kanamycin,KaA)分子制备酶标记物,采用棋盘滴定法确定链霉亲和素(Streptavidin,SA)的包被浓度为8 mg/L,通过单因素实验优化了检测条件,建立了卡那霉素A酶联适配体检测(Enzyme-linked aptamer assay,ELAA)方法。本方法半抑制浓度(IC50)为2.2"g/L,检出限(LOD)为0.04"g/L,检测范围(IC20~IC80)为0.07~71.5"g/L,与结构类似物无明显交叉反应;对牛奶、猪肉、猪肝、鸡肉、蜂蜜样品加标回收率在78%~100%之间,平均相对标准偏差小于11.1%。本方法特异性强、灵敏度高,适用于食品中卡那霉素A的快速检测。

关 键 词:单链DNA(ssDNA)  适配体  卡那霉素A  酶联适配体
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