毛细管区带电泳高效分离和高灵敏检测α-乳清蛋白和β-乳球蛋白 |
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作者姓名: | 刘一 廖一平 白玉 刘虎威 |
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作者单位: | 北京分子科学国家实验室,生物有机与分子工程教育部重点实验室,北京大学化学与分子工程学院分析化学研究所 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(Nos.20805001,21175005);科技部仪器专项(No.2012YQ090194-9)资助项目 |
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摘 要: | α-乳清蛋白和β-乳球蛋白系由牛乳清提取的乳糖制品中的主要蛋白杂质,是引起食物及药物过敏的主要过敏原。因此,在食品安全及医药安全领域,对二者的分离及痕量检测是至关重要的。本研究建立了一种简单、快速、灵敏、重现性好的毛细管区带电泳(CZE)方法,使用简单的电泳体系和样品处理步骤,实现了α-乳清蛋白和β-乳球蛋白的基线分离和痕量检测。CZE条件如下:25 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0),分析电压+30 kV,毛细管温度25℃,紫外检测波长205 nm,压力进样5 kPa"10 s。在此条件下,样品分析时间为2 min,α-乳清蛋白和β-乳球蛋白的检出限(LOD)分别为3.0和12 mg/L;迁移时间和峰面积的相对标准偏差(RSD,n=6)分别小于1%和6%,符合实际样品检测要求。本方法已成功用于实际乳糖样品的分析,在相关领域也有很好的应用前景。
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关 键 词: | 毛细管区带电泳 乳糖 α-乳清蛋白 β-乳球蛋白 |
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