白斑综合症病毒超分支滚环检测试纸的构建及应用 |
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引用本文: | 赵玉然,尹伟力,岳志芹,李八方.白斑综合症病毒超分支滚环检测试纸的构建及应用[J].武汉大学学报(理学版),2014(1). |
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作者姓名: | 赵玉然 尹伟力 岳志芹 李八方 |
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作者单位: | 中国海洋大学食品科学与工程学院;烟台出入境检验检疫局;山东出入境检验检疫局技术中心; |
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基金项目: | 国家质量监督检验检疫总局科研项目(2012IK018);国家质量监督检验检疫总局公益性项目(201210055) |
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摘 要: | 依据白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)的囊膜蛋白VP28基因核苷酸序列设计特异的锁式探针,建立了WSSV超分支滚环扩增检测方法并构建试纸条.结果表明,WSSV超分支滚环扩增锁式探针在T4DNA连接酶作用下37℃连接30min,而后在Bst DNA聚合酶大片段作用下61℃反应50min,即能够实现病毒靶序列的有效检出.灵敏度实验表明,WSSV超分支滚环扩增试纸最低检出限为10拷贝/μL,是常规PCR(聚合酶链式反应)法灵敏度的100倍.特异性实验表明,该方法能够保证对WSSV的特异性检测.利用该试纸检测68份虾样本,与PCR方法检测结果基本一致,但更为灵敏和直观.
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关 键 词: | 锁式探针 对虾白斑综合症病毒 超分支滚环扩增 检测试纸 |
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