| 基于CRISPR/Cas技术的传染性病原精准便携化检测系统 |
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| 引用本文： | 刘一辰,赵茹健,吕佰阳,宋德锋,唐艺丹,姜艳芳,李冰凌.基于CRISPR/Cas技术的传染性病原精准便携化检测系统[J].分析化学,2024(2):187-197. |
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| 作者姓名： | 刘一辰 赵茹健 吕佰阳 宋德锋 唐艺丹 姜艳芳 李冰凌 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学技术大学应用化学与工程学院;2. 中国科学院长春应用化学研究所,电分析化学国家重点实验室,;3. 吉林大学中日联谊医院普通外科;4. 吉林大学第一医院基因诊断中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No.22004118)；;吉林省科技发展计划重点研发项目(No.20230203193SF)资助~~； |
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| 摘 要： | 以核酸为检测靶向的分子诊断方法是传染性病原体检测的金标准，但将其应用于便携化或现场快速诊断时仍存在多种限制和挑战，如特异性差、操作繁琐和便携化难等。规律间隔成簇短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白（Cas）-荧光检测方法有望大幅提升核酸识别的特异性和信噪比。本研究开发了环介导等温扩增（LAMP）-CRISPR/Cas-便携化灰度读取仪检测系统。在CRISPR RNA (crRNA)存在下，利用CRISPR/Cas12a体系实现了对自主设计的甲型和乙型流感病毒核酸LAMP扩增反应体系的精准荧光检测，验证了CRISPR/Cas体系的高选择性和通用性。配套自主开发的便携化灰度读取仪，可同时实现荧光信号的低成本采集和高可靠性可视化判读，检测结束后直接输出样品的阳/阴性结果。利用本检测系统对实际样本进行了分析，验证了其可靠性和实用性，证明了本系统能够实现流感病毒的高灵敏、高特异性便携化分析。
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| 关 键 词： | 等温扩增 CRISPR-Cas 荧光 便携化检测 流行性病原 灰度读取仪 |
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