基因重组人Gamma-干扰素发酵和提取优化工艺的研究 |
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引用本文: | 张耀东,洪深求,张丽华,耿信笃.基因重组人Gamma-干扰素发酵和提取优化工艺的研究[J].陕西师范大学学报,1998(2). |
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作者姓名: | 张耀东 洪深求 张丽华 耿信笃 |
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作者单位: | 陕西师范大学化学系,西北大学现代分离科学研究所 |
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摘 要: | 对基因重组人Gamma-干扰素(rIFN-γ)PBV220DH5α工程菌株的发酵工艺进行了研究.结果表明,采用在250mL摇瓶中装液量为150mL,按照1∶40的稀释比进行两次扩大培养,并在大肠杆菌生长最为活跃的对数生长期内进行诱导表达效果最好.收集菌体以后,将菌体进行冷冻和超声破碎,并在2.0mol/L脲中浸泡8h~9h以清洗杂蛋白,然后用7.0mol/L盐酸胍(Gu·HCl)提取.在优化工艺条件下,rIFN-γ的收量为9.0×106IU/L~12.8×106IU/L,总蛋白为79.5mg/L~127.2mg/L,比活为5.6×105IU/mg~8.0×105IU/mg,SDS-PAGE电泳含量可达60%~80%,使PBV220DH5α工程菌株获得了高效表达.
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关 键 词: | 干扰素 发酵 菌体破碎 提取 包含体 |
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