| 人血管抑素AK(1-3)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 海燕,扈廷茂,扈会平,汪伟成,苏慧敏,王永胜.人血管抑素AK(1-3)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J].内蒙古大学学报(自然科学版),2005,36(1):58-62. |
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| 作者姓名： | 海燕 扈廷茂 扈会平 汪伟成 苏慧敏 王永胜 |
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| 作者单位： | 内蒙古大学生命科学学院,呼和浩特,010021;内蒙古大学生命科学学院,呼和浩特,010021;内蒙古大学生命科学学院,呼和浩特,010021;内蒙古大学生命科学学院,呼和浩特,010021;内蒙古大学生命科学学院,呼和浩特,010021;内蒙古大学生命科学学院,呼和浩特,010021 |
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| 基金项目： | 内蒙古教育厅基金项目(ZD01069) |
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| 摘 要： | 用6月龄大月份流产的新鲜肝脏组织为材料,提取总RNA,通过反转录得到cDNA,并以此为模板,经PCR得到人Angiostatin基因的AK(1-3)片段.将此PCR产物直接与载体pMD18-T连接,转化大肠杆菌DH5α.经蓝白菌落筛选,PCR和酶切检测,筛选出阳性克隆,命名为pMDA,测序证明克隆序列与GenBank发表序列一致,大小为858bp.用Sal 和Bgl 酶切将该基因插入载体pQE40,并转化宿主菌M15pREP4].经质粒电泳PCR和酶切检测筛选阳性克隆,得到表达载体pQEA,插入基因与载体上小鼠DHFR基因重组形成嵌合基因.在30℃,2×YT培养基(Kan25μg/mL Amp200μg/mL),2mmol/LIPTG条件下诱导pQEA/M15pREP4]表达.所得菌体总蛋白经SDS-PAGE分析,结果表明,在预期的61kD处得到一条特异带,为AK(1-3)cDNA与载体固有基因DHFR-6хHis的重组蛋白表达产物.实验结果为抗肿瘤药物的研制提供了条件.
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| 关 键 词： | 血管抑素 表达载体 诱导 |
| 文章编号： | 1000-1638(2005)01-0058-05 |
| 修稿时间： | 2003年9月1日 |
Cloning of Human Angiostatin K(1-3)Gene and Its Expression in E.coli |
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| HAI Yan,HU Ting-mao,HU Hui-ping,WANG Wei-cheng,SU Hui-min,WANG Yong-sheng.Cloning of Human Angiostatin K(1-3)Gene and Its Expression in E.coli[J].Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Neimongol,2005,36(1):58-62. |
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| Authors: | HAI Yan HU Ting-mao HU Hui-ping WANG Wei-cheng SU Hui-min WANG Yong-sheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | angiostatin expression vector induction |
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