温度对铽（III）-转铁蛋白溶液构象的影响

在pH 7.4，0.01 mol/L N-2-羟乙基哌嗪-N’-2-乙磺酸（Hepes）条件下，铽 （III）与N，N’-二（2-羟苄基）乙二胺-N，N’-二乙酸（HBED）结合并发生交换 相互作用使铽（III）荧光增强10~4倍，通过监测铽（III）545 nm荧光强度的变化 测定了Tb-HBED配合物的条件稳定常数是lgK = 14.30 ± 0.49；Tb-HBED配合物中 配体、铽（III）荧光强度均随着温度的升高而降低。在pH 7.4，0.01 mol/L Hepes条件下，Tb_N-apoTf-Tb_C配合物中蛋白质的荧光强度随着温度的升高而降 低，而能量受体铽（III）的荧光强度随着温度的升高而增强，主要源于铽（III） 与螺旋5色氨酸残基间的无辐射能量转移；当温度由0 ℃上升到55 ℃时，平均能量 转移效率AE值增加了29%，给体、受体间距离R有约4.2%的减小，温度变化引起 Tb_N-apoTf-Tb_C配合物大的构象变化；铽（III）与人血清脱铁转铁蛋白的结合使 蛋白质的变性温度降低。同样条件下，Tb_N-apoOTf-Tb_C配合物与Tb_N-apoTf- Tb_C配合物有所不同，虽然能量给体的荧光强度随着温度的增加而减小，但铽（ III）荧光强度没有明显的增强；铽（III）对蛋白质的变性温度几乎没有影响。