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微波水解-液相色谱-原子荧光光谱法测定硒蛋白中的硒代氨基酸
引用本文:刘瑶,杜兴媛,张朝阳,刘淑琴,陈娥,胡百顺,刘小芳,秦邦,刁英,靳素荣,胡中立,陈永波. 微波水解-液相色谱-原子荧光光谱法测定硒蛋白中的硒代氨基酸[J]. 中国无机分析化学, 2022, 12(5): 98-104
作者姓名:刘瑶  杜兴媛  张朝阳  刘淑琴  陈娥  胡百顺  刘小芳  秦邦  刁英  靳素荣  胡中立  陈永波
作者单位:恩施土家族苗族自治州农业科学院,恩施土家族苗族自治州农业科学院,恩施土家族苗族自治州农业科学院,恩施土家族苗族自治州农业科学院,恩施土家族苗族自治州农业科学院,恩施土家族苗族自治州农业科学院,恩施土家族苗族自治州农业科学院,恩施土家族苗族自治州农业科学院,武汉轻工大学生命科学与技术学院,武汉大学,武汉大学,恩施土家族苗族自治州农业科学院
基金项目:鄂西民族专项(2017AKB073);恩施土家族苗族自治州农业科学院青年科技创新:2021-005。
摘    要:针对酶解法测定硒代氨基酸操作复杂,时间长,水解不完全且水解产物不稳定等问题,建立一种微波水解-液相色谱-原子荧光光谱仪测定硒蛋白中硒代氨基酸的方法。样品经HCl(6 mol/L)微波水解后,调节pH值至7.5,采用阴离子色谱柱,pH=6.0的(NH_(4))_(2)HPO_(4)(40 mmol/L)溶液为流动相,流速0.6 mL/min,等度洗脱12 min的条件对硒代胱氨酸(SeCys_(2))、甲基-硒代半胱氨酸(MeSeCys)和硒代蛋氨酸(SeMet)进行分离,用原子荧光光谱仪测定其含量。微波水解条件采用星点设计-响应面法进行优化,优选最佳水解条件为:称样量20 mg,水解温度150℃,水解时间40 min。SeCys_(2)、MeSeCys和SeMet均在0~100 ng浓度范围内呈线性关系,相关系数均大于0.999,检出限分别为0.07、0.03和0.14 mg/kg,RSD分别为5.6%、4.6%、3.7%(n=6)。用来测定硒代氨基酸,耗时短,成本低,水解完全,操作简单,水解产物稳定,能够科学评价硒蛋白中硒代氨基酸的组成,对硒蛋白产品的质量控制和溯源提供了科学方法,值得推广应用。

关 键 词:硒蛋白  硒代氨基酸  微波水解  星点设计-响应面法
收稿时间:2021-12-15
修稿时间:2021-12-30

Determination of selenoamino acids in selenoprotein by microwave-assisted acid hydrolysis-liquid chromatography-atomic fluorescence spectromety
Liu Yao,Du Xingyuan,Zhang Chaoyang,Liu Shuqing,Chen E,Hu Baishun,Liu Xiaofang,Qin Bang,Diao Ying,Jin Surong,Hu Zhongli and Chen Yongbo. Determination of selenoamino acids in selenoprotein by microwave-assisted acid hydrolysis-liquid chromatography-atomic fluorescence spectromety[J]. Chinese Journal of Inorganic Analytical Chemistry, 2022, 12(5): 98-104
Authors:Liu Yao  Du Xingyuan  Zhang Chaoyang  Liu Shuqing  Chen E  Hu Baishun  Liu Xiaofang  Qin Bang  Diao Ying  Jin Surong  Hu Zhongli  Chen Yongbo
Affiliation:Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture Academy of Agricultural Sciences,Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture Academy of Agricultural Sciences,Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture Academy of Agricultural Sciences,Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture Academy of Agricultural Sciences,Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture Academy of Agricultural Sciences,Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture Academy of Agricultural Sciences,Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture Academy of Agricultural Sciences,Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture Academy of Agricultural Sciences,Wuhan Polytechnic University,Wuhan University,Wuhan University,Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture Academy of Agricultural Sciences
Abstract:
Keywords:Selenoprotein  selenoamino acid   microwave hydrolysis   star point design-response surface methodology
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