| 利用压电生物传感器研究核因子NF—κB与其特异结合DNA的相互作用 |
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| 引用本文： | 张波,闫慧慧,蒋滢,罗阳,府伟灵.利用压电生物传感器研究核因子NF—κB与其特异结合DNA的相互作用[J].分析测试学报,2009,28(4). |
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| 作者姓名： | 张波 闫慧慧 蒋滢 罗阳 府伟灵 |
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| 作者单位： | 第三军医大学,西南医院,检验科,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金，军队攻关课题 |
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| 摘 要： | 设计并合成了核因子NF-κB的特异结合DNA序列探针,在其5端巯基化修饰后固定在基频10 MHz的石英晶体金膜表面,构建压电DNA-蛋白质相互作用生物传感器,研究了传感器的响应特性及NF-κB的p65蛋白亚基与其特异DNA结合的亲和常数Ka.DNA探针浓度在0.25 ～2.0 μmol/L范围内,随着探针浓度的增加,传感器的响应频率逐渐增大,当探针浓度超过2.0 μmol/L时,传感器的响应频率反而降低;反应缓冲液镁离子浓度、pH对p65蛋白亚基与其特异DNA结合有影响,当MgCl2浓度为50 mmol/L、pH 7.5时,p65蛋白亚基与其特异DNA结合引起的传感器响应频率最大;在p65质量浓度为10 ～40 mg/L时,结合反应引起的频率变化与p65质量浓度呈线性相关,检测批内相对标准偏差(RSD)小于5%,批间RSD小于10%,最大结合量和结合常数Ka分别为(49.6±1.5) ng和(3.92±0.14)×106 L*mol-1.构建的压电DNA-蛋白质相互作用生物传感器具有结构简单、操作方便、不需标记、实时检测等优点,可直接用于核因子NF-κB与DNA的相互作用研究.
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| 关 键 词： | 压电生物传感器 核因子NF-κB 脱氧核糖核酸 相互作用 |
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