| 碱性果胶裂解酶基因pelA在E.coli中的表达和酶学性质研究 |
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| 引用本文： | 翟超,曹军卫.碱性果胶裂解酶基因pelA在E.coli中的表达和酶学性质研究[J].武汉大学学报(理学版),2001,47(4):477-480. |
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| 作者姓名： | 翟超 曹军卫 |
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| 作者单位： | 武汉大学生命科学学院, |
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| 摘 要： | 根据核苷酸序列分析结果设计引物,通过PCR的方法,在嗜碱芽孢杆菌NTT33的总DNA和p1350中分别扩增到预计大小的片段,证明p1350中的外源DNA片段来自于嗜碱芽孢杆菌NTT33.同时也获得了含有pelA完整ORF的DNA片段.经计算,该基因表达的成熟蛋白质的分子量为34.76×103.构建表达载体pBV220-pel,在E.coliDH5a中进行表达.SDS-PAGE检测发现,表达的蛋白质分子的大小约为35×103,与预测的相符.初步研究其酶学性质发现,该酶在pH9.0～pH10.0,45℃的条件下有较高的活性,而且必需Ca2+参与反应.
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| 关 键 词： | 碱性果胶裂解酶 基因 嗜碱芽孢杆菌 PCR 基因表达 pelA基因 DNA片段 酶活性 |
| 文章编号： | 0253-9888(2001)04-0477-04 |
| 修稿时间： | 2000年12月19 |
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