| 双链特异性核酸酶介导的高灵敏度microRNA分析 |
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| 引用本文： | 李晓利,王愈聪,张学晶,赵云颉,刘成辉,李正平.双链特异性核酸酶介导的高灵敏度microRNA分析[J].化学学报,2014(3):131-136. |
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| 作者姓名： | 李晓利 王愈聪 张学晶 赵云颉 刘成辉 李正平 |
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| 作者单位： | 河北大学化学与环境科学学院;陕西师范大学化学化工学院; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(Nos.21105020,20905018);河北大学引进人才项目(No.2009177)资助~~ |
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| 摘 要： | 基于氧化石墨烯(GO)对荧光标记单链DNA探针的荧光猝灭效应以及双链特异性核酸酶(DSN)选择性切割DNA/RNA杂合结构中DNA单链的特性,本文建立了一种新型恒温信号放大方法用于microRNA(miRNA)的高灵敏度检测.靶标miRNA首先与荧光DNA探针杂交,DSN能够特异性地将杂合双链中的DNA探针水解为碎片但不会降解miRNA,GO对酶切产生的寡核苷酸碎片吸附能力显著降低,使得荧光基团远离GO表面而不被猝灭.释放出的miRNA可再次发生与荧光DNA探针杂交、DSN酶切等反应,如此反复,可实现恒温条件下一个miRNA分子与多个探针杂交、酶切、释放荧光基团的循环过程,最终体系的荧光信号得到显著放大,通过记录体系的荧光信号即可实现对靶标miRNA的灵敏检测.
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| 关 键 词： | microRNA 双链特异性核酸酶 氧化石墨烯 恒温信号扩增 荧光 |
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