高效液相色谱-串联质谱法检测配合饲料中11种蛋白同化激素含量

建立了快速分析配合饲料中睾酮、甲基睾酮、勃地龙、美雄酮、雄烯二酮、脱氢异雄酮、诺龙、丙酸诺龙、司坦唑醇、美伦孕酮、黄体酮11种蛋白同化激素的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法。样品采用乙腈提取，经PSA粉净化后上机测定。采用Phenomenex C₁₈(100 mm×2.1 mm,2.6μm)色谱柱，以0.01%甲酸溶液-乙腈作为流动相进行梯度洗脱，电喷雾离子源正离子模式检测，同位素内标法定量。结果表明，11种蛋白同化激素的线性范围为1～100 ng/mL，相关系数均为0.999，检出限为20μg/kg，定量下限为50μg/kg。50、250、500μg/kg加标水平下，鸡配合饲料中各蛋白同化激素的回收率为94.5%～111%，日内相对标准偏差(RSD)和日间RSD均不大于13%；猪配合饲料中各蛋白同化激素的回收率为90.1%～109%，日内RSD不大于9.0%，日间RSD不大于8.8%。实际样品中检出睾酮和勃地龙，含量分别为9.09～14.68 mg/kg和1.22～1.84 mg/kg。该方法可为饲料中蛋白同化激素的滥用监管提供技术支撑。