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1.
2.
从江浙蝮蛇毒腺中抽提总RNA,RT-PCR进行体外扩增,获得江浙蝮蛇蛇毒蛋白C激活因子基因,克隆至pGEX-5X-3载体中,对3个重组克隆分别作DNA全序列分析,通过遗传密码推导出相应的氨基酸序列,与其它已知的丝氨酸复白酶蛇毒蛋白的氨基酸作比较,其中许多上氨基酸有很强的同源性,该基因的成功克隆,不仅推导出江浙蝮蛇蛇毒蛋白C激活因子的蛋白质序列,也为进一步开展江浙蝮蛇蛇毒蛋白C激活因子蛋白质工程的研究工作打下良好的基础。 相似文献
3.
4.
Cytosine deaminase gene ofEscherichia coli strain H-30 was cloned, and its initiation codon of ‘GTG’ was mutated to ‘ATG’ by PCR. Prokaryotic recombinant expression
vector pBV220-CD was constructed. Clone with high enzyme activity were selected by detecting their specific activity of cytosine
deaminase. 5-FC(5-FC, 5-fluorocytosine) could induce the lethal toxicity to cells containing active CD gene. DNA sequence
analysis indicated that there were 16 altered bases and 5 of them resulted in the alteration of amino acids in predicted peptide
by comparing DNA sequence of the clone H-30-CD-11 with high enzyme activity with CD gene reported in Gene Bank. 相似文献
5.
Optimal design and operation of bioreactors for insect cell culture is facilitated by functional relations providing quantitative
information on cellular metabolite consumption kinetics, as well as on the specific cell growth rates (μG). Initial specific consumption rates of glucose, malate, and oxygen, and associated changes in μG, were measured forSpodoptera frugiperda clone 9 (Sf9) cells grown in batch suspension culture in medium containing 7–35 mM glucose, 0–16 mM malate, and 4–16 mM glutamine.
The initial specific glucose consumption rate (q
G
) could be described by a modified Michaelis-Menten equation treating malate as a “competitive” inhibitorK
1 = 6.5 mM) and glutamine as a “noncompetitive” inhibitorK
I
= 14 mM) ofq
G
, with aK
m
of 7.1 mM for glucose. All three carbon sources were found to increase μG in a saturable manner, and a modified Monod equation was employed to describe this relationship (μGmax = 0.047 h-1). The initial specific oxygen consumption rate (qO2) in Sf9 cells could be related to μG by the maintenance energy model, and it was calculated that, under typical culture conditions, about 15–20% of the cellular
energy demand comes from functions not related to growth. Fitted parameters in mathematical expression for μg: K4, Monod constant for glucose (mM); K5, modified Monod constant for malate (mM); K6, Monod constant for glutamine (mM); mo2, specific consumption rate of oxygen by the cells under zero-growth conditions (nmol/cell/h); qF, initial specific fumarate production rate (nmol/cell/ h);q
G
, initial specific glucose consumption rate (nmol/cell/h); qGmax, maximum initial specific glucose consumption rate (nmol/cell/h);q
M
, initial specific malate consumption rate (nmol/cell/h); qo2, initial specific oxygen consumption rate (nmol/cell/h); Yo2, cell yield on oxygen (cells/nmol); μ, initial specific cell growth rate (h-1); μg, initial specific cell growth rate (h-1); μGmax, maximum initial specific cell growth rate (h-1). 相似文献
6.
基于克隆选择的粗糙集属性约简方法 总被引:6,自引:1,他引:6
基于免疫克隆选择的原理,提出了一种新的粗糙集属性约简方法,将属性集合的分类近似质量作为进化目标,利用免疫反应的分布性特点通过局部并行搜索实现全局优化,并采用抗体更新和亲和力抑制手段来维持群体的多样性,保证了各抗体局部优化解的稳定性,从而获得了多个优化约简集合,通过机械故障诊断数据的实例应用,表明该方法可以获得多个符合分类质量要求的属性约简集合,因此满足了设备故障诊断的特征优化选择要求。 相似文献
7.
Fractalkine基因真核表达质粒的构建及其在小鼠肝癌细胞中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
为克隆小鼠趋化因子Fractalkine(.FK)基因,构建真核表达质粒,并在小鼠肝癌细胞中表达,用以进行肿瘤的基因治疗,用RT-PCR法,从小鼠乳腺癌细胞D2F2扩增FK的cDNA,插入pCR2.1 TOPO载体,测序证实后,将其亚克隆至质粒pIRES中构建FK真核表达载体;用脂质体将重组质粒转染小鼠肝癌MM45 T.Li细胞,经G418筛选获得抗性细胞克隆,用RT-PCR和免疫化学方法鉴定转染细胞中FK基因的表达.结果表明:经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒,RT-PCR和免疫化学方法证明转基因MM45T.Li细胞克隆中存在小鼠FK基因的表达。 相似文献
8.
9.
杨树无性系木材纤维长度和宽度的株内变异 总被引:7,自引:0,他引:7
对7个杨树无性系纤维形态的测定研究表明,前6、8、11年内7个无性系纤维长度在胸径处的变异不显,最大的I-69杨比最小的95杨纤维长度增加了6.6%。纤维长度和宽度在7个无性系中从髓心到树皮的径向变异均表现为显增加,但宽度增加没有长度增加显。纤维形态在株内纵向变异规律为:纤维长度在同一年轮内不同高度间的变异均是树干基部较小,随树高的增加纤维长度逐渐增加,树高增加到5.6m后纤维长度达到最大,随后波动较小,至17.6m又开始下降;纤维宽度在树干基部到3.6m的范围内较大,而超过3.6m后开始减小。回归分析表明,纤维长度与年轮及树干高度的关系可用多项式描述。树木生理年龄是影响纤维形态的一个主要因子。 相似文献
10.