酵母原生质体形成中的电镜观察

用蜗牛酶处理对数期啤酒酵母和异常汉逊酵母细胞,可以有效地从中分离到原生质体透射电镜观察证明了细胞中周质体的存在,揭示了酵母原生质体的释放机理和蜗牛酶的作用位点。     

多效唑提高柑桔原生质体抗寒性的研究

多效唑可以提高未经低温锻炼的Ｍｕｒｃｏｔｔ桔橙胚性愈伤组织在低温下的原生质体活力和原生质膜稳定性，从而提高原生质体抗寒力，并且多效唑的这个作用受钙信使系统的调节。     

应用原生质体融合技术选育L-异亮氨酸生产菌

以黄色短杆菌WY10和ASL495为亲本菌株，分别摸索了其原生质体形成和再生的条件，并在此基础上，进行了原生质体融合试验，考察了PEG浓度、融合时间等条件对原生质体融合的影响；最后利用所确定的条件对两亲株进行了融合，筛选出目的融合子WYA09和WYA17，带有双亲株标记Met^-和Leu^-。经产酸验证后，产酸量没有大幅提高，但副产氨基酸(主要是亮氨酸)减少，对工业生产中分离提纯工作和下一步的筛选高产菌工作都大有益处。     

He-Ne激光在异种间原生质体融合中的应用

用632.8nm 12mW的氦氖激光及聚乙二醇（PEG）复合诱导融合枯草芽孢杆菌与黑曲霉原生质体.为了提高枯草芽孢杆菌的糖化酶产酶能力,对两亲本在融合中采用不同的激光照射时间,选育出的融合子与枯草芽孢杆菌亲本相比,糖化酶酶活提高了2倍,并通过酯酶同工酶谱分析对融合子进行了鉴定,结果表明:融合子遗传性状与亲本相比发生了显著变化,通过传代培养,融合子具有良好的遗传稳定性.     

微生物原生质体辐射诱变及其红外吸收特征的研究

本文测出两种微生物原生质体(黑曲霉和阿氏假囊酵母)和DNA分子红外吸收光谱的几个主要吸收峰位置是极为一致的,两种原生质体和DNA分子经过辐照后对红外吸收均表现出不同程度的变化,这些变化可能是由于细胞内DNA分子经辐射后发生了一定变化,相应地导致了菌体的变异。上述两种微生物经辐射诱变后,比较诱变株及亲株红外吸收光谱,结果表明,尽管经过若干传代,诱变林和亲株红外吸收仍保持了某些一致性,同时又因经过诱变表现了某些变化,由此表明,微生物的原生质体和DNA分子的红外吸收与辐射诱变之间具有一定程度的相关性。     

L－谷氨酰胺生产菌定向选育的初步研究

以天津短杆菌ＴＧ－８６６为出发菌株，利用亚硝基胍、硫酸二乙酯等常规诱变方法以及原生质体融合法最终筛选出一株谷氨酰胺生产菌ＧＭＮ－１８［ＭＳＯ~Ｒ＋８－ＡＧ~Ｒ＋ＳＧ~Ｒ＋（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４~Ｒ］，在适宜条件下平均积累谷氨酰胺２７．３ｇ／Ｌ。     

欧当归原生质体再生植株

从继代后3～5天的欧当归幼叶胚性细胞悬浮系游离的原生质体,分别以KM8P、MS、改良MS、NT、D2、DPD及B5为基本培养基进行浅层液体培养,以改良MS进行平板培养和固液双层培养。在激素组合和浓度(2.4-D0.2mg/l,KT0.5mg/l,NAA1.0mg/l)及渗透稳定剂(0.5M甘露醇)相同的条件下,在KM8P中的植板率(40％)显著高于其它培养基中的植板率(0—15％)。在KM8P中(0.35M葡萄糖作渗透稳定剂),不同激素组合及浓度植板率不相同,上述激素组合中最高(50％)。葡萄糖作渗透稳定剂时0.3M优于0.4M,同时优于相同浓度的甘露醇和蔗糖。改良MS浅层培养和双层培养植板率几乎相同(15％),而平板培养银低(1％)。在KM8P中(激素同上,0.35M葡萄糖,CH250mg/l,CM 10ml/l),25天后原生质体形成肉眼可见的小愈伤组织。及时转移到固体愈伤组织增殖培养基上,诱导出胚性和非胚性两种愈伤组织,分别转移到分化培养基上后,两者分別通过体细胞胚胎发生和器官发生途径获得了完整再生植株。     

黄色短杆菌原生质体形成和再生条件研究

本文研究提高谷氨酸黄色短杆菌原生质体再生率的措施。按所研究的最适实验条件获得的再生率,比文献[1]报道的高150％,比文献[2]报道的高67％。     

He-Ne激光诱变黑曲霉Sx的原生质体

对生淀粉糖化菌黑曲霉Sx用混和酶制取原生质体进行了探索.在GM培养基中加入一定量的Cu²⁺、Mn²⁺,原生质体产量较高;采用pH4～5的蜗牛酶、纤维素酶、溶菌酶的混合酶,最佳浓度比为:1.5:3.5:1.5(mg/mL).取在GM培养基中培养17～18h的菌丝,在32℃酶解3h,原生质体产量最高,达到2.4×10⁵个/mL;在加入β-巯基乙醇及二硫苏糖醇处理菌丝时,原生质体产量提高近3倍.在再生培养基中,加入终浓度为30mmol/LMgSO₄时,原生质体再生率由16.7%提高到25.6%.用He-Ne激光照射原生质体时,功率9mW照射30min时致死率为50%,随着时间的延长,原生质体存活率降低.采用波长632.5nm、功率9mW、光斑直径5mm的He-Ne激光多次照射诱变,筛选出一株酶活力最高菌株黑曲霉Sy,活力提高51%,经连续传代5次,酶活力稳定.     

温度对光敏色素诱导的黄化绿豆幼苗下胚轴原生质体膨大的影响

本文以黄化绿豆幼苗下胚轴原生质体为材料,观察了不同温度处理下,经红光,红光 远光照射的原生质体体积的变化。实验结果表明:在29℃红光处理下的原生质体体积达到相对最大体积,该现象为随后的远红光所逆转,高于33℃或低于17℃红光处理的原生质体体积基本无变化。据此认为,在适宜的温度范围内,光敏色素在诱导黄化绿豆幼苗下胚轴原生质体膨大中起重要的调控作用。