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通过PCR扩增出猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)聚合酶部分片段,反向插入逆转录病毒表达载体pLXSN中,用脂质体法将重组质粒plxas-pol转染PA317细胞,经抗生素G418筛选出稳定的产毒细胞克隆,分别扩大培养后,取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,细胞克隆产生的重组病毒效价达9.0×105CFU/mL。用高效价假病毒感染IBRS2细胞,再经抗生素G418筛选,提取细胞克隆总RNA,经RT-PCR证明plxas-pol整合入IBRS2细胞。以TGEV感染IBRS2细胞和具有抗性的IBRS2细胞所产生的细胞病变为指标,证明该反义RNA对病毒有明显抑制作用,抑制率约为80%。用2×103和4×102TCID50/mL剂量的TGEV感染时,引起细胞死亡的时间分别为21 h和27 h,与对照组相比,抗性细胞系可明显延迟因病毒感染引起细胞死亡的时间。 相似文献
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在缺失了3'LTR U3区内病毒的启动子／增强子序列的逆转录病毒载体pLXSNd中,用血管内皮生长因子受体KDR的特异性启动子调控了TNFa在血管内细胞ECV304中的靶向表达。将构建的载体pLXSN-TNFa,pLXSNd-KDRp-TNFa和空载体pLXSN用PA317细胞包装后获得重组病毒,并用重组病毒分别感染NIH3T3细胞和ECV304细胞,培养物上清的ELISA结果证明,KDR启动子指导的TNFa在KDR阳性细胞ECV304中的表达量为在KDR阴性细胞NIH3T3中的表达量的8倍;而TR指导的TNFa在这两种细胞中的表达无明显差异,实现了TNFa在血管内皮细胞中的靶向表达,这可能为肿瘤基因治疗提供新途径。 相似文献
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观察了转染Oct-4基因对人脂肪来源干细胞性状的影响.首先将Oct-4基因全序列亚克隆至逆转录病毒载体pMSCVneo中,构建逆转录病毒重组质粒,然后以脂质体介导转染包装细胞PT67,成功建立PT67-Oct4细胞系,随后转染人脂肪来源干细胞(adipose-derived stemcells,ADSCs)中,最后对高表达Oct-4基因的ADSCs性状进行观察.实验结果表明,对高表达Oct-4蛋白的ADSCs-Oct4同未转染Oct-4的ADSCs相比,ADSCs-Oct4在形态学、表面标志、核型等方面无明显差别,接种ADSCs-Oct4细胞8周后裸鼠体内未形成肿瘤.以上结果说明ADSCs-Oct4细胞遗传性状稳定,无致瘤性,为深入开展ADSCs研究提供了实验依据. 相似文献
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目的：综述艾滋病的流行现状和治疗进展。方法：检索有关献进行综合分析。结果：艾滋病是HIV引起的改命性慢性传染病，流行形势严峻，各国感染人数不断增加，有的地方已经到了失控的地步。结论：目前的治疗不能根除体内的HIV，高效抗逆转录病毒治疗(HAART)，可产生完全的病毒抑制，显延长病人的生命。 相似文献
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笔者在肯塔基大学(美国肯塔基州，列克星敦市)医学中心神经科进行了一年的研究工作。我的导师是Avindra Nath，医学博士，神经科教授，全美和世界知名的神经科专家。我们的科研工作取得了巨大的成功，这与Nath博士对科研计划及工作人员的精心、合理的安排是分不开的。 相似文献
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《科技导报(北京)》2009,27(10)
患有血友病的艾滋病患者可采用高效抗逆转录病毒治疗
一项6年的疗效评价分析研究表明,患有血友病的艾滋病患者可采用高效抗逆转录病毒治疗（HAART）,不但可以控制HIV复制和恢复免疫细胞．而且不会对血友病患者的出血状况、关节功能和体能造成不良影响. 相似文献
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将ａｎｔｉ－ｒａｓ核酶基因Ｒ８克隆于不同的逆转录病毒载体，并导入逆转录病毒包装细胞质ＰＡ３１７，得到具一次感染性的缺失性病毒，通过测定病毒滴度选择Ｒ８基因的高效重组转录病毒载体。 相似文献
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为了观察caspase依赖的脱氧核糖核酸酶(CAD)及其抑制剂ICAD对星形孢菌素(STS)诱导的C6细胞凋亡的影响,用含有ICAD/DFF45和caspase抗性的ICAD/DFF45突变体ICAD DM基因的复制缺陷型逆转录病毒载体转染包装细胞,并用产生的病毒感染大鼠神经胶质瘤细胞株C6,筛选获得稳定表达目的蛋白的细胞.结果发现STS可显著诱导ICAD组的C6细胞出现DNA凋亡梯带,而ICAD DM组不出现DNA凋亡梯带;与ICAD DM组相比,STS对ICAD组MTT代谢的抑制作用更强(P<0.05);透射电镜观察显示ICAD DM组的细胞核形态改变弱于ICAD组.表明ICAD/DFF45的切割应在CAD/DFF40的激活中占主导地位,抑制ICAD/DFF45的切割并不能阻止凋亡的发生,但可延迟细胞死亡的速度,对染色质凝聚和核固缩的出现亦有一定抑制作用. 相似文献