急性心肌梗塞的实验室诊断

实验室检测对急性心肌梗塞诊断、治疗和疗效的观察有着重要意义。从早期的心肌酶谱(谷草特氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸磷酸激酶和肌跋磷酸激酶同工酶)到现在的肌红蛋白和肌钙蛋白等检测为临床提供了及时准确的检测数据，提高了临床诊断的准确率，使急性心肌梗塞患者得到了及时有效的治疗。     

血清肌钙蛋白Ⅰ检测在病毒性心肌炎诊断中的应用

目的　研究肌钙蛋白Ⅰ(CTnⅠ)在病毒性心肌炎诊断中的应用价值.方法　应用定量ELISA法检测血清CTnI,应用生化自动分析仪检测血清肌酸激酶(CK).对40例病毒性心肌炎和30例健康对照组进行对比研究.结果　病例组CTnI检测值显著高于对照组(P<0.01);CTnI在血清中存在时间较长,在不同病程中,CTnI异常率高于CK异常率.结论　CTnI可作为病毒性心肌炎的实验室诊断指标,特别是在亚急性期和恢复期有助于病毒性心肌炎的诊断.     

人血清中cTnI的化学发光酶免疫分析研究——实验条件的优化

采用高效化学发光试剂3-(2'-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3"-羟基)苯-1,2-二氧杂环丁烷磷酸(AMPPD)作为检测底物, 并将传统的ELISA两步双抗夹心法改为一步法, 得到了高灵敏测定人血清中心肌肌钙蛋白I(cTnI)的化学发光酶免疫分析优化条件. 采用单因素变化法和方阵滴定法得到的最佳实验条件为: 捕获抗体包被浓度为10.0 μg/mL, 以pH=7.0的PBS作为免疫反应缓冲底液, 以含质量分数为1.0%的BSA pH=9.6的碳酸盐溶液缓冲液, 于4 ℃封闭过夜, 生物素-检测抗体(Biotin-IgG2)以及碱性磷酸酶-亲和素(ALP-Avidin)结合物均采用1:2000稀释度, 免疫反应条件为37 ℃, 孵育时间60 min, 以去离子水作为洗涤剂, 以1:100稀释的AMPPD作为发光反应底物, 发光反应时间10 min(37 ℃). 检出限为0.02 ng/mL, 比现行ELISA法灵敏度提高一个数量级; 测定周期约75 min, 比两步法ELISA快得多; 线性范围(0.04~36.20 ng/mL)比ELISA法扩宽了两个数量级; 加标回收率97.5%~102.8%, 对标准样品的测定结果与用ELISA法的测定结果吻合; 重复性好, 3个样品批内变异系数均小于8.5%(n=12).     

肌钙蛋白的结构和功能

肌钙蛋白（troponin）在节肌肉收缩中起到了重要的作用，因此一直成为研究的热点。本文分别介绍了troponin是如何发现的，及其结构与功能．此外还简要阐述了troponin所参与的肌肉收缩的钙调节机制。     

大强度运动对心肌肌钙蛋白Ⅰ及其降解酶μCalpain的影响

目的:观察急性、慢性大强度运动对血清心肌肌钙蛋白I及其降解酶μCaplpain的影响.方法:慢性运动组大鼠每天进行120min负重8%的游泳训练,每周6d共6周,第6周末进行一次性负重8%的力竭运动,急性运动组饲养到第6周末进行一次性负重8%的力竭运动,安静组常规饲养.各组均24h后取材,检测血清cTnI和心肌组织SOD、CAT活性、MDA含量和μCalpain mRNA表达.结果:急、慢性大强度运动后血清cTnI浓度显著上升,伴随μCalpain mRNA表达增加(P＜0.001),血清cTnI与μCalpain存在显著相关性(P＜0.001),但两个运动组之间血清cTnI水平、μCalpain mRNA表达没有显著差异,血清cTnI与抗氧化酶SOD活性呈显著负相关性.血清cTnI与MDA含量呈正相关,存在显著相关性(P＜0.05).结论:大强度运动可以导致cTnI降解、抗氧化酶活性下降和过氧化物堆积.大强度运动引起氧化应激反应和μCalpain mRNA表达增加,可能是激活μCalpain引起cTnI降解的原因.     

肌钙蛋白Ⅰ的提取纯化

心肌肌钙蛋白Ⅰ具有极强的心脏特异性，可以通过检测患者血清内心肌肌钙蛋白Ⅰ的含量来诊断急性心肌梗塞。利用肌钙蛋白Ｃ和肌钙蛋白Ⅰ在钙离子存在下具有特异性结合的性质，制成了肌钙蛋白Ｃ亲和凝胶。利用肌钙蛋白Ｃ－肌钙蛋白Ⅰ亲和层析，提取和纯化了人和牛心肌肌钙蛋白Ⅰ，由１００ｇ心肌中可以提取到６０ｍｇ，以后可用来制备抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ的单克隆抗体杂交瘤细胞。     

肌钙蛋白I对小儿心肌炎诊断及与酶学对比研究

目的 评估血清心肌肌钙蛋白I (cTnI) 对小儿心肌炎的诊断价值,并与肌酸激酶(CK)及其同功酶MB(CK-MB)进行对比研究.方法 全自动生化分析仪对cTnI,CK及CK-MB进行定量检测.结果 1)心肌炎组cTnI,CK及CK-MB均明显高于正常对照组(P<0.001).cTnI升高38例,占76%;CK升高21例,占42%;CK-MB升高25例,占50%.cTnI与CK,CK-MB呈正相关关系.2)治疗2周后,cTnI与对照组比较有显著性差异(P<0.001),CK及CK-MB与对照组无显著性差异(P>0.05).3)心肌炎组22例ST-T改变患儿测cTnI升高20例(91%),CK升高8例(37%),CK-MB升高6例(27%).结论 cTnI及CK,CK-MB对小儿心肌炎的诊断均较敏感,其中cTnT对心肌损害的敏感性及特异性均高于CK和CK-MB.cTnI诊断时间窗宽于CK,CK-MB,特异性也高于心肌酶学检查.     

增强型酶催化发光免疫分析法高灵敏测定血清中心肌肌钙蛋白Ⅰ

基于辣根过氧化物酶（HRP）催化 H₂O₂-Luminol系统,对一种新型酚类衍生物 4-（1,2,4-三氮唑-1-基）苯酚对化学发光的增强作用进行了研究。用HRP标记急性心肌梗死标志物心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）单克隆抗体,通过cTnⅠ的双抗体夹心免疫反应,建立了简单、灵敏和快速检测人血清中的cTnⅠ含量的增强型酶发光免疫分析方法。实验结果表明,cTnⅠ在1.2 ~ 24 ng/mL浓度范围内与增强型发光强度具有良好的线性关系（R=0.99）,变异系数（n= 8）为 4.7%。最后,使用该方法对人血清样品中的cTnⅠ含量进行测定,测试结果具有较好的稳定性和精度,能够满足临床检测要求。     

急性心肌梗死患者D-二聚体、cTnT及心肌酶谱联合检测的临床意义

为探讨急性心肌梗死患者D-二聚体、肌钙蛋白及心肌酶谱联合检测的临床意义,选择30例健康者（对照组）和100例患者（病例组）进行D-二聚体、肌钙蛋白及心肌酶谱（AST、LDH、CK、CK-MB）检测,并把100例患者（病例组）分为3组,分别为36例AMI组,34例不稳定型心绞痛（UAP）组,30例稳定型心绞痛（SAP）组。结果表明,AMI组及UAP组中D-二聚体、肌钙蛋白及心肌酶谱（AST、LDH、CK、CK—MB）的升高程度较SAP组和健康对照组显著增高（P〈0．05）;AMI组肌钙蛋白（cTnT）较UAP组明显增高（P〈0．05）;UAP组肌钙蛋白（cTnT）较对照组明显增高（P〈0．05）;D-二聚体、肌钙蛋白及心肌酶谱（AST、LDH、CK、CK—MB）的升高程度与心肌梗死的面积正相关（P〈0．01）。提示D-二聚体、肌钙蛋白及心肌酶谱（AST、LDH、CK、CK—MB）联合检测有助于急性心肌梗死诊断的提高。