免疫组织化学染色过程中出现问题及对策

免疫组织化学法由最初的直接免疫荧光标记法,逐渐发展出现了多种方法。其敏感性和特异性不断得到提高,该方法具有技术统一,定性可靠,定位精确和定量准确等优点,但由于其步骤繁多,影响因素众多。本文列举了在该技术应用过程中存在的一些常见问题,并分析其中可能的原因。实验者应系统地分析和查找染色过程中原因,以便找到有效的解决方法,更要严格操作步骤,减少人为失误造成的干扰。     

Preparation of Polyclonal Antibodies Against Testis-specific Protease 50 and Characterization of Antibody Specificity

Introduction TheTSP50genehasbeenidentifiedasoneofthe testis specificoncogenes,whichisexpressedathigh levelsinapproximately92%ofhumanbreastcancer samples,makingitanattractivemolecularmarkerand apotentialtargetfordiagnosisandtherapy[1].Itisho mologoustomany…     

链佐菌素对大鼠胰岛损伤的病理形态免疫组化研究

应用胰岛素,胰高血糖素和生长抑素抗血清,通过免疫组化染色对正常（对照组）和ＳＴＺ诱导的糖尿病大鼠（实验组）胰岛的病理形态进行了观察。结果显示：实验组胰岛Ｂ细胞发生明显变性坏死,对照组与实验组表达胰岛素呈阳性的胰岛分别为９２．４％,２３．３％,二者之间的显著性差异（Ｐ〈０．００１）,实验线胰岛素的表达胰岛胞具有直接损伤作用,Ａ细胞的增生可能与ＳＴＺ有关,并参与升高血糖和胰岛素含量降低效应。     

无蹼壁虎消化道组织学及组化观察初报

Ｃａｒｎｏｙ固定,常规石蜡包埋、切片、Ｈ．Ｅ染色、ＰＡＳ反应、ＲＮＡ反应,对无蹼壁虎消化道的组织学进行光镜观察．结果表明：其消化道由同心圆的粘膜层、粘膜下层、肌层和浆膜层组成．绒毛发达,绒毛的上皮细胞为单层柱状上皮．消化腺为分枝管状腺．ＰＡＳ反应显示柱状细胞纹状缘,杯状细胞和腺细胞呈强阳性,与分泌的粘多糖有关．ＲＮＡ反应显示腺细胞呈强阳性,与腺细胞分泌活动有关．     

正交试验选择组织电极的最佳分析条件

本文用正交试验法对花椰菜组织Ｌ－抗坏血酸传感器和香蕉组织儿茶酚类化合物传感器的分析条件进行了优化，通过与单因子分析方法及４种儿茶酚类化合物之间正交试验结果的比较，说明用正交试验选择组织传感器的最佳分析条件，在少量的试验次数内，得到较多的分析实验信息，是一种较理想的试验方法。     

啤酒对胃粘膜下神经丛影响的酶组织化学研究

目的:探讨啤酒对胃粘膜下神经丛神经元功能的影响。方法:以小白鼠作为实验对象,用20只刚断乳昆明种(清洁级)小鼠随机分为两组,A组(10只)饲以标准饲料,强制以啤酒为饮料,B组(10只)饲以标准饲料,自由饮自来水,经2周喂养后处死,取小鼠胃体部胃壁做SDH、LDH酶组织化学检测。结果:(1)A、B组小鼠胃壁均无明显组织学损害。(2)A组粘膜下神经丛SDH强阳性(+++)者占总数的52.1％,阳性(++)者占47.9％;B组粘膜下神经丛SDH强阳性(+++)者占总数的78.1％,阳性(++)者占21.9％;(3)A组粘膜下神经丛LDH强阳性(+++)者为零,阳性(++)者为100％;B组粘膜下神经丛LDH强阳性(+++)者占总数的20％,阳性(++)者占80％;结论:长期饮用啤酒,A组小鼠胃壁组织结构与B组对比,无明显组织学损害;A组小鼠胃壁粘膜下神经丛神经元的有氧代谢和无氧酵解较B组有所减弱,显示其增加胃粘膜肌层活动及降低胃腺分泌功能。     

人正常子宫内膜树突状细胞的周期性变化

目的：研究人正常子宫内膜上树突状细胞(dendritic cell，DC)的分布特点。方法：对10例人正常子宫内膜组织应用HLA-DR单克隆抗体和CD1a蛋白抗体进行免疫组化染色，其中增殖期内膜4例、分泌期内膜3例、绝经期内膜3例，观察其中的阳性细胞。结果：10例正常子宫内膜标本中，5例呈HLA-DR阳性表达(增殖期4例，分泌期1例，绝经期0例)；4例呈CD1a阳性表达(增殖期3例，分泌期1例，绝经期0例)。结论：人正常子宫内膜组织中存在表达主要组织相容性复合体-Ⅱ(MHC-Ⅱ)类分子的DC，各时期的子宫内膜DC检出率不同。     

不同动物小肠肌间神经丛内NOS神经元分布的比较

采用NADPH-黄递酶组织化学法对草鱼、牛蛙、家鸡和大鼠小肠肌间神经丛内NOS阳性神经元的分布进行了比较研究．结果表明，NOS阳性产物在草鱼肌间神经丛中未见分布，而在其它几类动物中阳性反应明显．但在不同动物NOS阳性神经元的形态、分布、密度及神经纤维的分布存在差异．在牛蛙、家鸡和大鼠的小肠肌间神经丛中，NOS阳性神经元的分布从分散到集中，形态呈现由不规则形到规则形再到不规则形的复杂变化；神经节从无到有，神经网络由不发达趋于发达；而在每种动物中，NOS阳性神经元的密度沿肠道由前向后基本呈上升趋势，这种节段性的差异牛蛙极显著，家鸡和大鼠则不甚显著．实验结果提示，随着动物的进化，一氧化氮能神经元在肠肌间神经丛中的分布也更加复杂而有序，从而使胃肠道的调节更加精确．     

口腔扁平苔藓中TNF-α表达及其与肥大细胞的关系

目的:探讨TNF-α及肥大细胞在口腔扁平苔藓疾病发生发展过程中的作用及两者间的关系。方法:采用S-P免疫组化方法对31例口腔扁平苔藓及5例正常口腔黏膜中TNF-α的表达及肥大细胞的数量进行检测。结果:口腔扁平苔藓病损中TNF-α的阳性表达率是70 97%,与正常口腔黏膜相比,有显著性差异(P<0 05)。口腔扁平苔藓黏膜固有层肥大细胞数每5个视野为51 00±11 41,与正常口腔黏膜(21 21±4 27)比较,差异有显著性(P<0 05)。TNF-α的表达与肥大细胞的数量具有相关性(r=0 399,P<0 05)。结论:TNF-α及肥大细胞参与口腔扁平苔藓的发病及病变发展过程,且两者之间有相关性。     

成年雄性斑胸草雀脑多巴胺D1受体的分布

多巴胺是脑内关键的神经递质,它通过与多巴胺受体的作用及其下游的一系列反应来影响基因表达、神经调节和行为活动.在成年鸣禽中,中脑多巴胺能神经元投射到X区、HVC和RA等鸣唱相关核团,释放多巴胺的量受一定社会情境的影响,从而表现出directed song和undirected song等不同鸣唱行为.获得斑胸草雀脑中多巴胺受体的表达情况,为与社会情境有关的鸣唱行为及其他和多巴胺相关的行为活动的神经机制探究提供了基础,并可促进行为学、电生理等方面的研究.我们发现D1受体在斑胸草雀脑中的分布与其mRNA的分布基本一致:在脑的绝大部分区域都有分布;主要鸣唱核团HVC和RA有表达,与其周围区域差异不明显;LMAN中表达量较少;DLM中的表达量较高,并与其周围区域差异明显.但是纹状体内的表达与其周围区域的差异性没有mRNA明显;GCT中的表达量较多,与周围区域差异明显.