新型小肽疫苗的设计——Ⅰ.多联体生长激素释放抑制因子基因的化学合成、克隆与表达

小分子多肽制备抗体效率很低。我们设计了一种新的制备小肽疫苗的方法——小肽自连疫苗。这种新疫苗无需用其它蛋白质作载体,因此纯度高,单一性强,无其它杂抗原。尤其在需要进行自身免疫时这种疫苗效率较高。根据这种设计,我们合成并克隆了一个多联的生长激素释放抑制因子的基因,经过筛选、鉴定,得到了一个最大为六联体的生长激素释放抑制因子基因。该基因放到大肠杆菌中表达,并做Western检测,得到六联体生长激素释放抑制因子的表达菌株,该菌株的表达产物能与生长激素释放抑制因子的抗体发生免疫反应。     

氯代吲哚丁酸乙酯的合成研究

以Ｆｅ粉为催化剂,用直接通入Ｃｌ２的方法对吲哚丁酸乙酯进行氯化,其氯代产物经确证为一未见文献报道的新化合物,对其合成方法进行了详细的讨论。     

阿扑吗啡对LHRH—A促进鲤鱼GtH和GH分泌的影响

腹腔注射ＤＡ激动剂ＡＰＯ和ＬＨＲＨ－Ａ，研究ＡＰＯ对ＬＨＲＨ－Ａ促进鲤鱼ＧｔＨ和ＧＨ分泌的影响．结果表明：①ＬＨＲＨ－Ａ单独注射能极显著刺激ＧｔＨ分泌，且具有明显的剂量依存关系；ＡＰＯ单独注射显著抑制基础ＧｔＨ分泌，没有明显的剂量依存关系；两者结合注射，ＡＰＯ能显著抑制ＬＨＲＨ－Ａ促进ＧｔＨ的分泌；②ＬＨＲＨ－Ａ单独注射，能显著刺激ＧＨ分泌，且具有明显的剂量依存关系；ＡＰＯ单独注射，也能显著刺激ＧＨ的分泌；两者结合注射，ＡＰＯ不能有效增强ＬＨＲＨ－Ａ刺激的ＧＨ分泌的作用     

大黄鱼生长激素基因的克隆与表达

采用RT-PCR方法从大黄鱼脑垂体总RNA中克隆编码生长激素基因序列,并与数据库中鱼类生长激素基因进行比较.扩增获得的生长激素基因定向克隆到表达质粒pET-22b(+),并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达.表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占细胞总蛋白的5%.     

大肠杆菌中重组猪生长激素提取方法及变复性的比较研究

通过对基因工程菌pgh／E．coli BL21用酶溶解、超声波处理、超声波处理与液氮冻融相结合三种方法进行破菌，用盐酸胍法进行变复性，提取重组猪生长激素(rpGH)．结果表明用超声波处理与液氮冻融相结合的方法裂解细菌，盐酸胍法变复性，rpGH的提取率最高，达72．16％；而用尿素法对rpGH在大肠杆菌内所形成的包涵体变复性，rpGH的提取率仅为49．82％．     

Rapid growth and sterility of growth hormone gene transgenic triploid carp

Triploid carp (100%) with 150 (3n=150) chromosomes were obtained by crossing the females of improved tetraploid hybrids (♀, 4n=200) of red crucian carp (♀)×common carp (♂) with the males of diploid yellow river carp (♂, 2n=100). The crosses yielded transgenic triploid carp (positive triploid fish, 44.2% of the progeny) and non-transgenic triploid carp (negative triploid fish). Histological examination of the gonads of 24-month-old positive triploid fish suggested they were sterile and the fish were not able to produce mature gametes during the breeding season. Morphologically, both the positive and negative triploid fish were similar. They had a spindle-shaped, laterally compressed, steel grey body with two pairs of barbells. Most of the quantifiable traits of the triploid carp were intermediate between those of the two parents. The positive and negative triploid fish were raised in the same pond for 2 years. The mean body weight of the positive triploid fish was 2.3 times higher than the negative triploid fish. The weight of the largest positive triploid fish was 2.91 times higher than that of the largest negative triploid fish. Thus, we produced fast-growing transgenic triploid carp that have a reduced ecological risk because of their inability to mate and produce progeny.     

安科生物:借创新基金推进产业化

安徽安科生物工程（集团）股份有限公司分别于1999和2002年获得国家科技型中小企业创新基金的支持．“注射用重组人生长激素”和“抗精子抗体诊断试剂盒”项目分别获得60万元和55万元的资金支持。在创新基金的大力扶持下，安科生物顺利完成了项目的产业化。     

外源性生长激素对改善腹腔感染时生长激素不敏感状态中的作用

探索了外源性生长激素对改善腹腔感染时生长激素不敏感中的作用。应用盲肠结扎穿孔法（CLP）制备腹腔感染大鼠模型,同时给予外源性生长激素;应用放射免疫法测定血清生长激素（GH）水平;应用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法测定肝组织胰岛素样生长因子I(IGF-I)、生长激素受体（GHR）和细胞因子信号传导抑制体3(SOCS-3)mRNA的表达;应用ELISA测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平。结果表明腹腔感染组大鼠血清生长激素水平与对照组无明显差异,但肝组织IGF-ImRNA表达明显下降;给予外源性生长激素后可明显降低血清TNF-α和IL-6水平,同时可更快地促使GHR和IGF-ImRNA表达的上调及下调SOCS-3mRNA的表达。腹腔感染时机体存在对生长激素的不敏感状态,给予外源性生长激素后可明显地改善感染状态下机体对生长激素的敏感性。     

12种不同来源的生长激素等电点的预测

本文应用一个经过改进的可预测蛋白质及多肽等电点的数学模型,并辅以相应的计算机程序求解,预测了12种生长激素的等电点。