小鼠腹水癌细胞脂酶的亲和制备及一些性质的研究

在接种了血癌(L—7712)及腹水癌(Hep.A)的小鼠腹水癌细胞中存在远高于正常细胞的脂酶(Lipase)活力.本文通过免疫亲和层析方法从小鼠腹水癌细胞中纯化了该脂酶,比活力达到2000国际单位/mg.蛋白.经 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,纯度达电泳纯,为单亚基酶.分子量65kd.经等电聚焦电冰分析,等电点(PI)为5.3.     

粘质沙雷氏菌脂肪酶的固定化及催化拆分反式3-(4’-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯

 对粘质沙雷氏菌脂肪酶进行了固定化研究,确定硅藻土和环氧树脂Eupergit C是较好的固定化载体. 固定化后酶的热稳定性、 pH稳定性及储存稳定性均明显提高. 以Eupergit C共价固定的脂肪酶,其操作稳定性比硅藻土吸附酶好,重复使用10批次后,剩余酶活力还有50%左右,戊二醛交联对Eupergit C固定化酶稳定性的提高没有明显效果,而硅藻土吸附酶经戊二醛交联后稳定性有所提高,经5批次反应后剩余酶活力还有50%. 使用交联后的硅藻土固定化酶(1 g, 200 U), 在两相搅拌反应器(工作体积200 ml, 甲苯∶水体积比=1)中对地尔硫卓手性前体(±)-反式3-(4’-甲氧苯基)缩水甘油酸甲酯((±)-MPGM)(有机相浓度为0.5 mol/L)进行了催化拆分,经5批次反应后,共得纯(2R,3S)-(-)-MPGM 18.6 g, 产品光学纯度(对映体过量)>99%, 总收率为37.2%.     

脂肪酶催化水解反应纯化α-生育酚琥珀酸酯

α-生育酚琥珀酸酯（α-tocopherol succinate）是天然维生素E的衍生物，它是由琥珀酸与α-生育酚的β-色酮环的6位羟基成酯而形成的化合物（图1），由于丧失了自由的羟基而不具有维生素E的抗氧化活性，在空气中较为稳定，因其可保护α-生育酚的6位羟基，使α-生育酚在储存和运输中稳定性增加，而广泛用于α-生育酚的运输和储存。     

有机相中α-氰基-3-苯氧基苄醇乙酯的酶促醇解反应

研究了有机相中脂肪酶催化α-氰基-3-苯氧基苄醇乙酯的醇解化反应。制备α -氰基-3-苯氧基苄醇。考察了酶、溶剂、醇、醇用量、溶剂水含量以及底物浓度等 因素对反应的影响，结果表明Novozym435脂肪酶催化活性最高，经实验确定的最佳 条件为：脱水甲苯为溶剂，正辛醇为酰基受体，正辛醇、酯的摩尔比为1.5:1，酶 量为8 mg/mL时的最佳底物浓度为108.13 mmol/L，在上述条件下反应30 h酯的转化 率 > 96%。     

野生木瓜营养成份及其对NO^—2消除能力的比较研究

野生木瓜营养成份测定结果为：１００ｇ鲜木瓜含有１７种氨基酸,总量为１３２９２２ｍｇ．其中Ｇｌｕ１７２４６ｍｇ,粗蛋白１８１ｇ;粗脂肪０３０ｇ,还原糖１４３ｇ;维生素Ｃ０２２ｍｇ,Ｂ族维生素２８３ｍｇ;主要无机元素Ｋ２１３ｍｇ,Ｎａ３４ｍｇ,Ｃａ１５６６ｍｇ,Ｆｅ２０４ｍｇ,Ｚｎ０７１４ｍｇ．研究结果表明,木瓜对ＮＯ－２具有较强的消除作用,消除量达到０４８ｍｇ／ｇ（ＦＷ）．     

CS-MCM-48复合载体固定化脂肪酶催化苯乙酮-锅法还原转酯化拆分反应

将天然聚合物壳聚糖(CS)涂覆在介孔分子筛MCM-48表面制得CS-MCM-48复合载体,控制CS与介孔分子筛MCM-48质量比为1∶10时,CS-MCM-48的比表面积、平均孔径和孔容分别为408 m2/g、2.14 nm和0.38 cm3/g.在磷酸盐缓冲溶液-异辛烷混合溶剂中制备了固定化假单胞菌脂肪酶(Pseudomonas CepaciaLipase,PSL)PSL/CS-MCM-48,并用于潜手性苯乙酮一锅法还原转酯化手性拆分反应.结果表明,PSL/CS-MCM-48的催化活性和对映选择性均明显优于纯介孔分子筛MCM-48和壳聚糖制备的固定化酶PSL/MCM-48和PSL/CS.甲苯作溶剂,反应温度为40℃时,底物1-苯乙醇转化率达15.3%,产物(R)-乙酸苯乙酯和(S)-1-苯乙醇的对映体过量值分别为99%和18.0%,对映选择性参数E值达237,固定化酶PSL/CS-MCM-48显示出良好的手性拆分性能.     

溶剂和酰基受体对α-氰基-3-苯氧基苄醇乙醇的酶促对映体选择性转酯化反应的影响

研究了在有机溶剂中固定化Alcaligenes sp.脂肪酶催化α-氰基-3-苯氧基苄醇乙酯的对映体选择性转酯化反应，考察了不同性质的溶剂和酰基受体对酶的催化活性和选择性以及对产物稳定性的影响．结果发现在弱极性溶剂如正己烷中酶具有较高的催化活性但产物e．e．％值低，而且容易分解；在四氢呋喃等溶剂中酶催化活性相对低，但产物e．e．％值高，也较为稳定；但反应时间太长，会导致产物分解及纯度下降；不同酰基受体对酶反应无显著影响，甲醇为最佳酰基受体，太多醇会导致反应速率下降；溶剂水含量大于2．0％时对酶活性和产物稳定性产生明显不利影响．在优化条件下，酶反应可得到（S）-α-氰基-3-苯氧基苄醇产率＞48％，纯度＞99％e．e．     

火焰原子吸收光谱法测定木瓜中7种微量元素的含量

采用火焰原子吸收法测定光皮木瓜中钙,铜,铁,硒,锌,锰,镁等微量元素的含量。优化了仪器工作条件,利用标准曲线法对待测样品进行定量分析。在设定的浓度范围内,7种元素的质量浓度与吸光度呈良好的线性关系,相关系数为0.992 9～0.999 4,7种元素的检出限为0.211～9.268 mg/L。对样品进行7次重复测定,测定结果的相对标准偏差均小于3.0%,加标浓度为1.000 0～10.010 0 mg/L时,加标回收率为96.51%～104.55%。该方法具有操作简单、干扰少等优点,为木瓜的开发提供了科学依据。