猪传染性胃肠炎病毒聚合酶基因反义RNA对病毒的抑制作用

通过PCR扩增出猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)聚合酶部分片段,反向插入逆转录病毒表达载体pLXSN中,用脂质体法将重组质粒plxas-pol转染PA317细胞,经抗生素G418筛选出稳定的产毒细胞克隆,分别扩大培养后,取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,细胞克隆产生的重组病毒效价达9.0×105CFU/mL。用高效价假病毒感染IBRS2细胞,再经抗生素G418筛选,提取细胞克隆总RNA,经RT-PCR证明plxas-pol整合入IBRS2细胞。以TGEV感染IBRS2细胞和具有抗性的IBRS2细胞所产生的细胞病变为指标,证明该反义RNA对病毒有明显抑制作用,抑制率约为80%。用2×103和4×102TCID50/mL剂量的TGEV感染时,引起细胞死亡的时间分别为21 h和27 h,与对照组相比,抗性细胞系可明显延迟因病毒感染引起细胞死亡的时间。     

一种新颖的测定和分析羟自由基氧化损伤RNA及其分子机理的化学发光体系

近年来，羟自由基（^.OH)对DNA氧化损伤已受到广泛关注，但是很少研究^.OH对RNA的氧化损伤。其实，RNA与DNA一样，也是核酸的两大组分之一，也有许多重要功能。所以^.OH攻击RNA也会引起重后果，会造成细胞功能衰退甚至细胞死亡等。为此，我们建立了Vit.C-CuSO4-Phen-H2O2-PNA这一产生和测定^.OH氧化损伤RNA的化学发光体系，以便加强^.OH氧化损伤RNA的研究。通过对本体系测定条件的研究，得出了本体系最佳组方是：Vit.C,CuSO4,Phen,H2O2和RNA，浓度分别为350μmol/L,55μmol/L,350μmol/L,0.2mol/L和20μg/mL,体系pH为5．5，体系终体积为1mL。随后，利用本体系检测了槲皮素，咖啡酸，黄芩甙和芦丁抗^.OH氧化损伤RNA的作用，发现这四种抗氧化剂均能有效抑制^.OH氧化损伤RNA的分子机理，结果发现，^.OH清除剂硫脲几乎抑制全部发光，推测是因硫脲清除了引发剂^.OH所致；O^-.2清除剂SOD只能抑制小部分发光；^1O2清除剂叠氮化钠和苯甲酸都能抑制绝大部分发光。这些事实提示，^.OH是RNA氧化损伤的引发剂；O^-.2只是导致RNA氧化损伤的次要因素，^1O2才是导致RNA氧化损伤的最主要因素。     

生物小分子与铜锌超氧化物歧化酶相互作用的波谱学研究及其应用

本工作以ESR和NMR为主要手段,并结合其它生化方法,考察了氨基酸、核酸碱基、糖等生命基本物质,和抗坏血酸等生命必需物质与钢锌超氧化物歧化酶的相互作用,实验观测到氨基酸、核酸碱基和抗坏血酸在水溶液中可以与酶中的Cu²⁺作用而使其脱离活性部位,以小分子络合物形式游离在溶液中,同时使酶失活,脱离活性部位的Cu²⁺的比例和酶的失活程度取决于小分子配体的加入量及其与Cu²⁺的络合能力。此外,首次尝试使用ESR方法,并借助氨基酸与酶的作用,考察了铜锌超氧化物歧化酶在盐酸胍变性和热变性过程中的构象变化行为,结果表明这一方法是直观而有效的。     

慢性萎缩性胃炎与正常胃活检组织RNA分布的研究

采用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的核糖核酸酶（FITC－RNase）作为探针，结合半薄切片技术，观察了慢性萎缩性胃炎与正常胃活检组织中RNA的分布变化，结果表明：慢性萎缩性胃啖腺体细胞内RNA明显减少，分布部位与正常胃腺体细胞差异较大，这些结果于慢性萎缩性胃炎的病理诊断提供了一些依据，对进一步从分子水平上研究慢性萎缩性胃炎的病理变化及其与胃癌的关系具有一定的意义。     

MicroRNAs：从基础科学到疾病生物学

MicroRNAs是一类长度为21—24nt的非编码RNA，它们在真核生物的生长发育、组织器官形成、肿瘤发生、抗病毒反应等生理过程中发挥着至关重要的调控作用。第一个microRNA lin-4是1993年在线虫中被发现的，但直到2001年才受到生物学家的普遍关注，并迅速成为生命科学研究最热门的领域之一。     

熵与信息——麦克斯韦妖的启示

 在生物进化论的背后,存在两个带根本性的问题:一是生命的起源,即如何从无生命的物质变为有生命的物质,也可以说从无序到有序的问题;二是生物的遗传与变异,那就是从有序到有序的问题.对于第一个问题,目前科学家掌握的资料尚少,还没有得到明确的结论;而对于第二个问题,已经画出了一个基本的轮廓,这是20世纪自然科学的最重大成就之一.     

Hadamard变换显微图象分析III. 单细胞内DNA, RNA和蛋白质的 分析

本文用自制的Hadamard变换显微图象分析仪分析了AO和FITC染色的单细胞的荧光光谱,用该仪器获取了单个洋葱细胞核内DNA的分布图象,并在535nm处分别测定了AQ染色的鸡红血细胞及洋葱表皮细胞核的荧光强度。所得结果与生物学结果吻合,显示了该仪器在单细胞试样分析中的应用价值。     

Exact Fixed-node Quantum Monte Carlo： Self-optimizing Procedure

In this paper, a novel exact fixed-node quantum Monte Carlo (EFNQMC) algorithm was proposed, which is a self-optimizing and self-improving procedure. In contrast to the previous EFN-QMC method, the importance function of this method is optimized synchronistically in the diffusion procedure, but not be-fore beginning the EFNQMC computation. In order to optimize the importance function, the improved steepest descent tech-nique is used, in which the step size is automatically adjustable.The procedure is quasi-Newton type and converges super linear-ly. The present method also uses a novel trial function, which has correct electron-electron and electron-nucleus cusp condi-tious. The novel EFNQMC algorithm and the novel trial func-tion are employed to calculate the energies of 1 ^1A1 state of CH2, ^1Ag state of Cs and the ground-states of H2, LiH, Li2 and H2O.