中药土鳖虫溶栓成分的分离纯化研究

对土鳖虫水浸醇沉提取物2号样品进行了离子交换柱层析，得组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。实验结果表明，组分Ⅲ的溶栓活性明显高于组分Ⅰ和组分Ⅱ，其蛋白质占量为88．9％，分子量约为38，018，效价为313UK／mg，比活力为352UK／mg蛋白。将组分Ⅲ再进行凝胶过滤柱层析，得组分Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ。组分Ⅵ的生物活性高于组分Ⅳ和组分Ⅴ，蛋白质含量为89．3％，电泳呈现两条带，分子量约为34，623和39，811，效价为77UK／mg，比活力为86UK／mg蛋白。将组分Ⅵ进行反相高效液相色谱柱层析，收集保留时间为17min的洗脱峰，得到土鳖虫纯蛋白质，呈白色絮状，极易溶于水。再一次用反相高效液相色谱检查其纯度，保留时间为17．073min．无杂质峰。纤溶活性实验结果表明，组分Ⅵ既有直接降解纤维蛋白的作用，同时也有纤溶酶原激活剂样作用。     

氨基酸分析仪法快速检测土鳖虫中谷氨酸含量

采用氨基酸分析仪建立了土鳖虫中谷氨酸含量的检测方法,比较不同浓度的盐酸以及不同料液比、提取时间对土鳖虫中谷氨酸提取效果的影响。结果表明,土鳖虫中谷氨酸的最佳提取工艺为6 mol/L 的盐酸消解,料液比1:1（mg/mL）,水解时间22 h,建立的谷氨酸分析仪法回收率为99.2%,精密度试验相对标准偏差为0.19%,不同地区土鳖虫中谷氨酸质量分数存在较明显差异,范围为1.068%~1.149%。该方法重现性好、快速高效、操作简便,适用于土鳖虫中氨基酸含量的检测,可为其质量控制及资源深入开发提供技术支持。     

中药土鳖虫中4种微量元素的形态分析研究

按照传统煎煮法对中药土鳖虫中铜、锌、铁、镁4种元素进行提取;用微孔滤膜分离提取液中的可溶态与悬浮态;利用大孔吸附树脂柱对可溶态中的有机态与无机态进行分离;采用火焰原子吸收光谱法对各种形态中的4种元素进行测定。结果显示,土鳖虫中4种元素的总提取率在45.04%—63.20%之间,浸留比在98.56%—245.1%之间,悬浮态颗粒吸附率在10%左右,铜、锌、铁、镁的有机态与无机态的比例在171.8%—487.1%之间。     

土鳖虫糖蛋白的提取及抗肿瘤活性初步研究

以新鲜的雌性土鳖虫原药材为研究对象,其水提物经乙醇沉淀,Sevag法除蛋白,DEAE-50纤维素离子交换层析柱等方法分离纯化后,得到糖蛋白组分,用糖蛋白组分分别对两种肿瘤Hela和食管癌Eca109细胞进行体外药物敏感性实验,结果显示,氯化钠洗脱浓度为0.4 mol/L时的洗脱峰组分在低浓度(<10 mg/L)水平对以上两种肿瘤细胞均有明显抑制作用,表明土鳖虫具有潜在的抗肿瘤作用.     

中药土鳖虫中Ca、Mg、Zn和Mn 4种微量元素的含量测定

本文采用HNO3和HClO4消解土鳖虫样品,火焰原子吸收光谱法测定其中Ca、Mg、Zn、Mn含量。方法简单,精密度高,加标回收率在96.86%—102.46%之间,相对标准偏差(RSD)小于2.36%,结果令人满意。