高效液相色谱法测定血清中的皮质醇和皮质酮

皮质醇(F)和皮质酮(B)是人体内的两种肾上腺糖皮质激素。测定其在血液中的含量可以为研究糖皮质激素与人体的各种代谢及组织器官功能的关系提供必备的数据。以前测定血清中皮质醇、皮质酮常采用放射免疫法和荧光分光光度法等。本法采用高效液相色谱法测定,显示出快速、简便和准确的特点。     

激光治疗瘢痕疙瘩：Nd：YAG激光的临床探索和体外研究

瘢痕疙瘩，即皮肤瘤，是以皮肤结缔组织过度沉积为特征。可自发产生，也可以是局部创伤的结果。其治疗手段包括外科整形、x线照射、病变内注射皮质醇、全身用药和局部应用维甲酸。但这些手段都未证明是持续有效的。     

低强度激光照射对吸毒者β-EP及血浆皮质醇含量的影响

本研究着重观察低强度激光血液疗法对生理脱毒后稽延性症状患者β-EP（β-内啡肽）及血浆皮质醇含量的影响。方法：应用RIA法测定患者（60例,实验组,分三组）分别在治疗前（生理脱毒后7d-15d）和治疗后测定血清中β-EP及血浆皮质醇的含量,并将实验组分别与对照组比较,观察激光治疗与常规治疗的疗效的差异。结果：（1）对照组治疗后其血清中β-EP的含量无显著变化（P〉0．05）：激光血管内照射组停照后血清中β-EP的含量较照前均显著增加（P〈0．01）：鼻腔照射组β-EP的含量较照前也有较显著增加（P〈0．05）但不如激光血管内照射组。（2）治疗后对照组血浆皮质醇较治疗前无明显变化（P〉0．05）,而实验组1较治疗前显著降低（P〈0．01）,实验组2较治疗前也有较明显降低P〈0．05）但不如实验组1。     

白僵菌液体培养物中甾体基质和产物的薄层色谱及光密度扫描测定

为测定白僵菌液体培养物中基质Reichsteins化合物S(I)和它的11α-羟基化产物表皮质醇(Ⅱ),我们建立了薄层色谱(TLC)及光密度扫描测定法。现将本方法报告如下。     

纳米纤维固相萃取柱萃取-高效液相荧光法分析头发皮质醇

采用基于纳米纤维固相萃取的高效液相色谱-荧光测定(HPLC-Flu)法测定头发中的皮质醇水平.以新型纳米纤维萃取柱(PFSPE)提取头发样本浸出液,用100 μL乙醇洗脱,再加入230μL浓H2SO4反应2 min,反应物加水混合后用PFSPE柱提取,最后用50 μL甲醇直接洗脱后注入色谱体系进行分析.此方法的检出限为0.05 ng/g( S/N=3),日内精密度和日间精密度分别低于6.8％和8.9％,平均方法回收率为88.9％.本方法提取过程简便、快速、环保,而且可以准确测定头发样本中的皮质醇水平.     

Electrochemical Determination of Cortisol by Capillary Electrophoretic Enzyme Immunoassay

In recent years, capillary electrophoretic immunoassay (CEIA) has become a primary analytical tool in clinical diagnostics. The primary detection methods in CEIA are UV absorbance detection and laser induced fluorescence detection (LIF)1. The major disadvantages of the UV detector are the lack of sensitivity and not available for many antigens which are small molecules without strong UV absorbance. LIF is a more general approach to improve sensitivity. However, it is difficult to u…     

海洋鱼类血清游离皮质醇液质分析研究

血清样品中加入地塞米松作为定量内标,用氯仿提取,氮气吹干,V(甲醇):V(水)=1:3混合溶液定容后用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)对游离皮质醇进行分析。采用电喷雾电离源负离子模式,分别取m/z407.2和437.2作为皮质醇和内标的定量目标离子进行检测。结果表明,皮质醇与内标在BEHC18色谱柱上得到良好的分离,方法在0～200μg/L浓度范围内线性相关系数为0.9993。仪器检出限为1.64pg。方法平均回收率达到93.3%～98.1%,相对标准偏差小于10%。对采自浙江宁波几批大黄鱼(Preudosciaena Crocea)和鲈鱼(Lateolabrax Japonicus)血清进行测定,游离皮质醇含量在2.11～75.84μg/L范围内。与三重四极质谱仪(Q-Q-Q-MS)进行比较,仪器检测灵敏度要优于三重四极质谱仪;在0～2000μg/L。浓度范围内线性相关不及三重四极质谱仪的分析结果,但在0～200μg/L浓度范围内相关性相近。     

基于便携拉曼光谱仪和双层纸芯片的头发皮质醇超高灵敏检测

人头发中的皮质醇是反映现代人长期精神压力累积的主要临床标记物.建立了一种人发皮质醇的超高灵敏检测方法.方法基于表面增强拉曼光谱、免疫分析和双层纸芯片.纸芯片的第一层用于滤除人发提取液中的头发残渣（样品前处理）,第二层用于实施竞争性免疫反应和拉曼检测.固定在纸表面的皮质醇抗原和游离的头发皮质醇竞争结合能产生拉曼信号的皮质醇单克隆抗体,通过检测结合在纸表面的皮质醇抗原-抗体复合物的拉曼信号进行游离头发皮质醇的定量.在便携式拉曼光谱仪上,皮质醇抗体的拉曼信号经过优化,方法的检测限可以达到1 pg/mL,平行测定相对标准偏差为8.38%（n=6）.进行了两例实际样品检测,液质检测结果分别为0.771和0.153 ng/mL,本方法检测结果分别为0.63和0.247 ng/mL,两种方案的结果在一个数量级,证明了方法的实用性.利用此方法,一块芯片可以同时测定48个样品,专属性和准确性很好,特别适合于人群精神压力的普查.     

血清中皮质醇成分分析标准物质的研制

皮质醇是一种重要的肾上腺皮质激素,同时也是一种重要的临床诊断标志物,为保证检测结果具有溯源性、可比性和准确性,研制了血清中皮质醇成分分析标准物质。对血清样品进行分离、过滤、混匀、分装,进行均匀性检验、稳定性考察和定值分析。采用超高效液相色谱–同位素稀释串联质谱(UPLC–ID–MS/MS)法进行定值,混合健康男性血清和健康女性血清中皮质醇的定值结果分别为107.63 ng/g(U=1.44 ng/g,k=2),92.24 ng/g(U=1.68 ng/g,k=2)。采用CCQM–K63a比对样品对定值方法进行验证,测量结果在该比对参考值的不确定度范围内。研制的皮质醇成分分析标准物质符合国家一级标准物质技术要求。     

激光针灸对CIA大鼠血清IL-1β、IL-15、IL-17、TNF-α、VEGF和COR的影响

研究激光针灸在不同的作用方式和参数设置下,对Ⅱ型胶原蛋白诱导的关节炎(CIA)模型大鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素15(IL-15)、白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和皮质醇(COR)的影响。将大鼠随机分为模型组,药物组,针刺组,深部激光针灸1mW组、5mW组、10mW组,表面激光针灸50mW组、100mW组、150mW组,并设正常对照组,针灸穴位选择足三里和肾俞。治疗10d后取材,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定血清因子水平。模型组的血清IL-1β、IL-15、IL-17、TNF-α和VEGF均较正常组显著升高,有统计学意义(均为P0.001),COR较正常组显著降低,有统计学意义(P0.001)。治疗后,各治疗组的IL-1β、IL-15、IL-17、TNF-α和VEGF均较模型组有不同程度的降低,除个别组外,与模型组的差异均有统计学意义(P0.05、P0.01、P0.001);各治疗组的COR均较模型组显著升高,有统计学意义(P0.001)。各治疗组间相比,血清IL-1β水平在针刺组中最高,在表面激光针灸50mW组中最低,二者差异有统计学意义(P0.05);血清IL-15水平在针刺组中最高,在药物组中最低,差异无统计学意义(P0.05);血清IL-17水平在深部激光针灸1mW组中最高,在表面激光针灸100mW组中最低,差异有统计学意义(P0.001);血清TNF-α水平在深部激光针灸1mW组中最高,在药物组中最低,差异有统计学意义(P0.001);血清VEGF水平在深部激光针灸50mW组中最高,在深部激光针灸5mW组中最低,差异有统计学意义(P0.05);血清COR水平在针刺组中最低,在表面激光针灸150mW组中最高,差异有统计学意义(P0.001)。激光针灸能够有效降低CIA大鼠血清IL-1β、IL-15、IL-17、TNF-α、VEGF等促炎因子的表达水平,提高血清COR等抗炎因子的表达水平,其作用效果与激光针灸的作用方式和参数设置有关。