抗活化血小板单克隆抗体与尿激酶杂合分子的纤溶作用

用双功能团试剂将尿激酶(UK)B链和抗人活化血小板α-颗粒膜蛋白GMP-140单克隆抗体(SZ-51)的Fab片段共价偶联。偶联的杂合分子UK-SZ-51保留了原抗体的结合专一性,它在体外的溶栓效率较尿激酶提高约5倍,其溶栓作用对血浆中纤维蛋白原的含量无影响。     

CT引导立体定向治疗高血压脑出血及护理

高血压脑出血病人病情重 ,并发症多 ,死亡率高 .虽然近年来各种新技术不断开展 ,但其死亡率仍高达 2 5%～ 40 % [1 ] .我院自开展ＣＴ引导立体定向血肿碎吸加尿激酶血肿腔引流术治疗高血压脑出血手术以来 ,取得了较好的效果 .1　临床资料1 .1一般资料本组共 40例 ,男性 2 5例 ,女性 1 5例 ,平均年龄 58.2岁 .2 8例有明确高血压病史 ,不规则服用降压药 .入院时意识状态 (ＧＣＳ计分 ) :<7分 6例 ,8～ 1 1分 1 3例 ,1 2～ 1 5分 2 1例 .部位 :位于壳核 2 6例 ,丘脑 6例 ,皮层下 7例 ,小脑 1例 ,破入一侧脑室 9例 ,破入双侧脑室 4例 .血肿体积 …     

He—Ne激光血管内照射与尿激酶治疗脑梗塞对比研究及微观机理初探

将６２例脑梗塞患者随机分为两组,并分别用激光血管内照射（ＩＬＩＢ）及尿激酶进行治疗,继而对两组疗效进行对比性观察、测试及评估。文末对ＩＬＩＢ的作用机理进行了分析。     

Crystal Structures of Urokinase-type Plasminogen Activator in Complex with 4-（Aminomethyl） Benzoic Acid and 4-（Aminomethyl-phenyl）-methanol

Urokinase-type plasminogen activator （uPA） is a trypsin-like serine protease and plays a key role in several biological processes, including tissue remodeling, cell migration, and matrix degradation. The inhibitors of uPA have been shown to prevent the spread of metastasis and tumor growth, and accordingly uPA is widely recognized as a target for the treatment of cancer. In this work, we report the crystal structures of the complexes of uPA with its inhibitors： 4- （aminomethyl）-benzoic acid （AMBA） and 4-（aminomethyl-phenyl）-methanol （AMPM）, both at a resolution of 2.35 А. The inhibitory constants of these two inhibitors were measured by a chromogenic competitive assay, and it was found that AMBA is a better inhibitor for uPA （Ki = 2.68 mM） than AMPM （Ki = 13.99 mM）. The structural study shows that the binding mode of inhibitor AMBA on uPA is similar to that of AMPM on uPA, both docked into the active site S1 pocket of uPA. Structural details of these complexes are provided to explain the difference of inhibitory constants.     

尿激酶活性测定方法的比较

根据中国及日本药典,对测定尿激酶活性的两种方法的灵敏度和重复性进行了考察对比,对不同样品测定结果进行了比较。     

分离尿激酶的胍基型亲和色谱填料研究

尿激酶的精制一般使用亲和色谱法［’－‘ｊ．目前实际使用和文献报道最多的填料是在 ＳｅＰｈａｒｏｓｅ上键合对氨基苯眯（ｐ－ＡＢＺ）制得的［‘ｊ．这种填料分高效果较好,但机械强度不高,只能用于常压色谱,而且寿命较短．前文［‘１报道了用 ＳｅＰｈａｒｏｓｅ和聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球为基质, Ｐ－ＡＢＺ为配基分离尿激酶的亲和色谱填料的对照研究．本文报道以含肥基的有机小分子为配基,ＳｅＰｈａｒｏｓｅ及两种聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球为基质的分离尿激酶色谱填料的合成和性能试验．发现肥基己酸和精氨酸为配基的亲和色谱…     

新型磁性亲和吸附剂的制备及其在尿激酶纯化中的应用研究

合成了磁性聚乙烯醇和磁性聚甲基丙烯酸甲酯微球,并以它们为基质,用环氧氯丙烷、羰基二咪唑或溴化氰活化后,分别键合氨基乙酸、6-氨基己酸、乙二胺或己二胺为间隔臂,用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺盐酸盐或羰基二咪唑为偶联试剂,分别偶联对氨基苯甲脒、L-精氨酸甲酯、胍基乙酸或胍基己酸配体,合成了17种磁性亲和吸附剂,并用于尿激酶粗品的纯化.与前文制备的8种磁性亲和吸附剂作对照,研究了基质、活化试剂、间隔臂分子、偶联试剂及配体等因素对尿激酶纯化效果的影响.这些磁性亲和吸附剂在尿激酶的纯化中取得了较好的效果,大多数磁性亲和吸附剂的活性回收率在40%～70%之间,纯化倍数为15～40,吸附容量为0.08～0.2mg/mL.     

镧、铈对低分子量单链尿激酶基因在酵母中表达的影响

LaCl3能提高rscu-PA-32k在酵母中的表达效率，2和5mmol.L^-1LaCl3可以使表达产物活力提高13％和20％，从14．6U／ml分别增加到16．5和17．5U/ml，而CeCl3则使表达产物的活力降低，2和5mmol.L^-1 CeCl3分别使产物活力下降了21％和33％，从14＝6U／ml分别下降到11．5和9．8U/ml。     

尿激酶对纤维蛋白低亲和性的结构基础——Ⅰ.尿激酶及相关环饼结构域的三维结构预测

根据凝血酶原(Prothrombin)环饼结构域-1(PTK-1)2.8晶体X光衍射结构,用残基置换和构型建造(Modeling)预测了纤溶酶原环饼结构域-1(PGK-1),组织型纤溶酶原激活因子环饼结构域-2(PAK-2)和尿激酶原环饼结构域(UKK)的三维结构。预测的三维结构显示PGK-1具有典型的配体结合部位,PAK-2在结构上不具有和配体结合的典型正电荷中心,但邻近的69位精氨酸残基能和配体的羧基生成离子对。UKK在结构上不能形成和配体结合的正负电荷中心,这可能是尿激酶对纤维蛋白低亲和性的主要原因。     

葡萄糖甘油二脂对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响

为研究葡萄糖甘油二脂(GDG)对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响。应用圆二色谱法(CD)、聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)研究了GDG对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响。在GDG分别与单链尿激酶型纤溶酶原激活剂和链激酶相互作用后,使其二级结构发生改变,不同浓度的GDG对一些纤溶因子的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲产生不同程度的影响。GDG对纤溶酶原和纤溶酶的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲没有明显影响。利用SDS-PAGE发现了GDG促进纤溶酶原/单链尿激酶型纤溶酶原激活剂相互转化的作用。从而可得出结论,GDG对单链尿激酶型纤溶酶原激活剂和链激酶的活性产生影响,表明GDG通过改变单链尿激酶型纤溶酶原激活剂的内因性活性来促进纤溶作用。