应用共聚焦显微镜观察卵母细胞成熟过程中Cdc42活性变化

Cdc42属于GTP酶家族成员,参与细胞骨架调节和细胞发育,但在细胞分裂过程中的作用所知甚少.以爪蟾卵母细胞为模型,GFP-wGBD(Cdc42活性探针)和罗丹明-微管蛋白作为荧光标记物,采用共聚焦显微镜观察卵母细胞分裂过程中Cdc42活性变化.结果显示卵母细胞中,极体释放数分钟前,纺锤体上方和周边可见微弱的Cdc42活性,2 min～4 min内,活性逐渐增强,随后收缩环形成,胞质分裂发生.胞质分裂完成后,Cdc42活性消失.结果提示Cdc42活性可能与爪蟾卵母细胞胞质分裂有关.     

基于微流控的人卵母细胞特性检测

人的卵母细胞特性的研究对于临床医学具有重要意义,可以通过卵母细胞的大小对其活性进行研究。采用微流控平台与MATLAB算法相结合的方法,利用微流控器件的沟道对卵母细胞进行挤压,由于卵母细胞的活性不同对于挤压的反应也不同,活性越好的卵母细胞通过沟道时变形性越好,经检测卵母细胞有很好的活性;拍摄卵母细胞发生形变与卵母细胞通过沟道的视频,利用MATLAB程序进行图像处理得到卵母细胞的大小,测得卵母细胞的直径约为170μm。这种方法有别于传统方法,在一定程度上使用了算法识别,提高了卵母细胞分析统计的准确度,提升了工作效率。由于人的卵母细胞比较珍贵,只进行了初期实验研究,证明此方法确实可行。     

Notch信号通路对卵母细胞发育的影响

通过卵泡培养,对比Notch信号通路抑制剂L-658,458对初级卵泡和次级卵泡的影响,发现L-658,458抑制了初级卵泡和次级卵泡的发育,初级卵泡卵母细胞发生了凋亡,实时定量PCR和蛋白印记检测发现初级卵泡卵母细胞中P27在mRNA和蛋白水平表达升高,提示:Notch信号通路可能通过调控初级卵泡卵母细胞内p27表达调控卵母细胞存活。 更多还原     

小鼠卵母细胞染色体三维双光子荧光图像的轴向衰减

双光子荧光显微镜作为一种高分辨光学仪器,已经被广泛应用于生物样品的非侵入式三维光学成像中。相比共聚焦显微镜,双光子荧光显微镜拥有更深的探测深度。然而,即便如此,在对较厚的生物样品进行非侵入式光学三维成像时,样品的成像质量也往往会随着探测深度的增加而下降。在临床和生物学领域对研究母性遗传起重要作用的小鼠卵母细胞拥有较大的直径(80～100 μm),吸收和散射效应较为明显。本文研究小鼠卵母细胞染色体的三维双光子荧光图像随探测深度增加图像质量的衰减程度。通过对所得图像进行轴向衰减矫正,利用体积作为参数,将矫正前后小鼠卵母细胞内染色体三维双光子荧光图像进行对比。结果表明,由于吸收和散射效应,卵母细胞存在较严重的光学轴向衰减问题,因此,对用双光子荧光三维成像手段获得的小鼠卵母细胞图像进行衰减矫正是有必要的。这为进一步精确定量的研究卵母细胞内染色体的三维构像打下良好的基础。     

硬骨鱼类卵子发生研究及其应用前景

硬骨鱼类的发育有卵生和卵胎生两种形式，其卵子发生的过程相似，目前人为地将卵原细胞到卵母细胞分为6个连续时相。卵原细胞期的卵巢体积小，卵原细胞均一，单层滤期卵巢体积增大，初级卵母细胞为主，卵黄和滤泡细胞出现，细胞代谢加强，卵黄泡期卵巢亦增大，卵膜开始形成，卵黄沉积，出现卵黄粒和脂肪滴，卵黄充满期卵巢继续增大，卵母细胞个体急剧增大，卵黄球和皮质泡形成，个别出现油滴，卵膜增厚，成熟期卵巢和卵子达到最大，各种不同鱼类的卵膜形态不一，衰退期卵巢退回到单层滤泡期，多次产卵类型退回到卵黄充满期，继续保持产卵能力。卵子发生的过程受MIH，GtH等多种激素的调控。对硬骨鱼类卵子发生的研究，将为人工增养殖技术的改进提供理论依据。     

电脉冲激活猪卵母细胞的研究

通过对猪卵母细胞的电激活进行系统研究,结果表明：对于体外成熟卵母细胞,电场强度为 １ ２５０ Ｖ／ｃｍ ,脉冲时程为４０、６０ μｓ时,效果较好,一次脉冲激活率可达８５．３％ 和８７．１％ ;而对于体内成熟卵母细胞,电场强度为１ ５００ Ｖ／ｃｍ ,脉冲时程为４０、６０ μｓ 时,效果较好,一次脉冲激活率达８５．７％ 和８８．２％ ;增加脉冲次数并不能显著提高激活率,反而使卵母细胞裂解率显著增加;激活液选用０．３ ｍ ｏｌ／ Ｌ甘露醇（含０．１ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｍｇ Ｓ Ｏ４ ）时,添加 ０．１ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｃａ Ｃｌ２ ,获得较好的激活率（８７．８％ ）电脉冲激活卵母细胞后进一步培养,体内和体外成熟卵母细胞的发育率并无显著差异     

用于卵母细胞玻璃化冷冻的几种方法的传热分析

使用高冷冻速率和低浓度冷冻保护液来实现卵母细胞的玻璃化冷冻保存是目前卵母细胞低温保存的主要发展方向.文中选择四种具有代表性的用于卵母细胞玻璃化冷冻的方法:弹射法、OPS法、QMC法和Cryotop法,通过对它们传热特点的分析以及动态温度场分布的模拟计算,找出冷冻速率最高的方法.结果表明,Cryotop法的传热性能优于其...     

微黄镰玉螺卵黄发生过程中细胞器的变化

应用透射电镜技术观察微黄镰玉螺卵黄发生过程。结果表明：卵黄合成早期的卵母细胞，胞质内出现大量管状或泡状膜性囊泡，卵黄前体物质逐渐增多并开始向囊泡内聚集。在卵黄合成中期，细胞质内高尔基复合体和内质网活动很活跃，细胞质中爱渐形成和积累大量卵黄颗粒，核伸出伪足状突起，核质间交换频繁，卵黄合成后期，细胞南充满卵黄粒，细胞器不发达，但核糖体在整个卵黄合成期间很发达。电镜观察还表明微黄镰玉螺卵母细胞的卵黄颗粒形成 是通过多种胞器的共同作用完成的。高尔基复合体和内质网是参与卵黄粒形成的主要胞器，线粒体和核糖体也参与卵黄粒的形成。此外，对滤泡细胞与卵黄蛋白来源之间的关系作了进一步探讨。     

文昌鱼卵母细胞发育成熟激素调控的研究

本文用电子显微镜技术和放射免疫测定法研究了文昌鱼卵母细胞发育成熟的激素调控。结果表明外源性GnRH-A可激发文昌鱼卵母细胞的发育成熟和产卵。用放射免疫测定法进一步揭示了GnRH-A可诱发性类固醇激素增加1—3倍,尤其17β-雌二醇的升高,与卵母细胞合成卵黄物质相一致。这些结果首次有力地证明文昌鱼卵母细胞发育成熟的激素调控与脊椎动物相类似,对文昌鱼生殖内分泌生理学有重要理论意义。     

卵母细胞的卵龄对猪核移植效率的影响

对核移植中,猪卵母细胞的卵龄对核移植效率的影响进行了研究结果表明：体外成熟培养 ４８ ｈ 的猪卵母细胞最适合作为核受体,其激活率达 ７８．３％ ,并无裂解;去核率高达９０％ ;在作为核受体进行核移植时,融合率为７５％ ;重构胚胎的卵裂率为６４．６％ 卵龄进一步增大,激活率略有增加,但去核率、融合率和卵裂率均下降