复合酶酶解法提取褐藻糖胶及其结构分析和抗氧化性研究

用正交试验设计法研究了复合酶酶解法提取褐藻糖胶,使用sevage法脱蛋白,经DEAE-Sepharose FF离子交换层析后得到2个组分F1和F2,并分析了2个褐藻糖胶组分的结构,探讨了褐藻糖胶的抗氧化活性.优化提取工艺中褐藻糖胶的多糖质量分数是30.24%,硫酸根质量分数是21.25%.     

哺乳动物细胞是所得多肽复合酶CAD催化反应产物的 HPLC分析

本研究报道了以150mm×4.6mmI.D.Zorbaxoqcyuosyg.10mmoI·L^-1KH~2PO~4和500mmoI·L^-1LKH~2PO~4水溶液为洗脱液,梯度程序为0～5min(φ=1,体积分数)10mmoI·L^-1KH~2PO~4溶液,5～50min由(φ=1)10mmoI·L^-1KH~2PO~4溶液转换到(φ=1)500mmol·L^-1KH~2PO~4溶液时,高效液相色谱分离了哺乳动物细胞中所得肽复合酶ACD催化反应混合物三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和二氢乳清酸(DHO),确定了ATP,ADP和DHO的出峰顺序,制作了工作曲线,确定了催化反应混合物中ATP,ADP和DHO的相应浓度。     

海螺酶的制备、性质和应用研究

报道了从食草性海螺粒蝾螺和锈凹螺中制备海螺酶的方法，并且初步研究了酶的组分、性质及其在海藻生产上的应用。酶学分析表明：两种海螺酶均为复合酶，含有纤维素酶、木聚糖酶、褐藻酸酶、几丁质酶、α－和β－半乳糖苷酶和β－葡萄糖苷酶；同时研究也表明除β-葡萄糖苷酶、α-和β－半乳糖苷酶外，大部分酶的最适pH在6－7之间。用复合酶I（粒蝾螺酶）和复合酶Ⅱ（锈凹螺酶）溶液分别水解条斑紫菜、海带组织，均获得大量单细胞和原生质体。将获得的单细胞在改进的PES培养基中培养，细胞能正常分裂、长成正常的植株。在实际生产上，将获得的大量紫菜单细胞附着于尼龙网上，经过实验室短期培养再移于海中可长成正常叶状体，初步表明该方法在实际生产上具有广阔的应用前景。     

葡萄糖氧化酶-过氧化氢酶复合体系提纯异麦芽低聚糖

异麦芽低聚糖（IMO）具有低甜度、低热量、抗龋齿以及双歧因子特性等许多优异的生理功能。近年来,在医药保健、功能性食品和饲料添加剂等行业得到了广泛的应用。目前采用酶法生产的异麦芽低聚糖产品中异麦芽低聚糖的质量分数仅为50％左右,其中葡萄糖和麦芽糖的含量将近一半,     

哺乳动物细胞是所得多肽复合酶CAD催化反应产物的 HPLC分析

本研究报道了以150mm×4.6mmI.D.Zorbaxoqcyuosyg.10mmoI·L^-1KH~2PO~4和500mmoI·L^-1LKH~2PO~4水溶液为洗脱液,梯度程序为0～5min(φ=1,体积分数)10mmoI·L^-1KH~2PO~4溶液,5～50min由(φ=1)10mmoI·L^-1KH~2PO~4溶液转换到(φ=1)500mmol·L^-1KH~2PO~4溶液时,高效液相色谱分离了哺乳动物细胞中所得肽复合酶ACD催化反应混合物三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和二氢乳清酸(DHO),确定了ATP,ADP和DHO的出峰顺序,制作了工作曲线,确定了催化反应混合物中ATP,ADP和DHO的相应浓度。     

复合酶法提取洋葱多糖的研究

本文以洋葱为原料,以多糖提取率为考察指标,用苯酚-硫酸法测定多糖的总糖含量。采用正交试验确定了纤维素酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的最佳配比为18∶5∶10,进而采用中心组合设计对洋葱多糖的复合酶法提取工艺进行了优化。结果表明:在提取温度55℃、时间120min、pH为5.0、酶用量为0.4%、料液比为1∶40(m/V)时,洋葱多糖提取率为3.27%,多糖含量高达50.5%,实验重现性好。     

酶复合催化剂原位合成新方法及生物催化应用

工业生物催化面临两大重要挑战,一是可工业应用的酶催化反应类型仍然比较有限,远少于化学催化剂,因此需要拓展酶催化的反应类型;二是酶在苛刻的工业催化反应条件下尤其是在高温、有机溶剂、不适宜的pH等环境下稳定性较差,因此需要提高工业酶催化剂的稳定性.研究者已经开发了很多方法,以解决这两方面难题,例如酶的定向进化、定点突变、酶的计算机从头设计和构建人工金属酶等.本文系统介绍了本课题组开发的酶复合催化剂原位合成方法及其生物催化应用,期望为解决工业生物催化的上述挑战提供新思路.原位合成是构建酶-无机晶体复合催化剂的一种简便、高效、普适的方法.酶-无机晶体复合物中,限域包埋使酶具有高于常规固定化酶的催化活性和稳定性.该方法可以简便拓展至其它多种类型的无机晶体材料,显著提高酶的稳定性.无机晶体的限域包埋对酶分子结构和性能有着重要影响,通过理性设计复合催化剂的结构,可实现对酶的活性、稳定性以及多酶反应级联效率的有效调控.本课题组采用分子模拟和实验相结合的方法阐释了多酶-无机晶体复合催化剂所驱动的级联反应效率提高的关键因素.通过调控原位合成中金属离子和有机配体的浓度,实现了酶分子在缺陷型甚至无定形载体中的包埋.在此基础上,深入探讨了缺陷对酶分子结构和催化活性的调控机制,为酶复合催化剂的理性设计提供了依据.同样基于原位合成方法,本课题组构建了酶-金属团簇复合催化剂,实现了温和条件下酶催化和金属催化的高效耦合和协同.以脂肪酶-钯团簇复合催化剂为例,阐明了酶-金属团簇复合催化剂中二者相互作用对酶分子结构和活性以及金属催化活性的影响机制,为酶催化和金属催化相融合的研究提供了重要基础.我们对这一领域存在的挑战和未来重要的研究方向也进行了讨论,希望本文可以从催化剂工程角度为高效酶催化剂的设计以及生物催化应用领域的拓展提供新思路,推动该领域发展.     

复合酶法提取大蒜多糖及其抗氧化活性研究

用复合酶法对大蒜多糖的提取工艺进行研究,并考察了不同浓度沉淀多糖的抗氧化活性;以多糖提取得率为指标,苯酚-硫酸法测定多糖的总糖含量,采用正交实验确定纤维素酶、木瓜蛋白酶和果胶酶的最佳配比,然后在单因素试验的基础上,采用正交实验优化复合酶提取大蒜多糖的最佳工艺;分别用羟基自由基(·OH)和1-二苯基-2-苦基肼基(DPP...