江西省中华鳖种质状况及养殖方式调查

对江西省中华鳖的主要养殖企业分布、种质情况及养殖模式等进行了调查,结果表明:全省各地均有养殖,有一定规模的养殖企业主要分布于南丰县、黎川县、玉山县、永修县、余干县、进贤县和弋阳县等地;主要的养殖品系有鄱阳湖中华鳖、广东绿卡中华鳖、日本品系中华鳖、黄河中华鳖等;采用的养殖模式主要分为3种:常温养殖模式,控温高产养殖模式和生态化高产养殖模式。测量了不同养殖企业的6个中华鳖养殖类群的13项形态指标,从形态数据方面分析了不同养殖类群的种质。英明养殖类群系黄河中华鳖、日本品系中华鳖和台湾鳖的杂交种;富源养殖类群为鄱阳湖中华鳖,但推测其有广东绿卡中华鳖品系的混杂;进贤养殖类群是鄱阳湖中华鳖、广东绿卡中华鳖、日本品系中华鳖和黄河中华鳖等品系的混杂种;京丰养殖类群、兴初养殖类群和永修养殖类群是鄱阳湖中华鳖,但不排除有其他品系混杂的可能,其种质有待进一步研究。     

中华鳖腐皮病的病理组织学研究

中华鳖腐皮病由细菌感染引起,四季均可流行,是危害中华鳖最严重最常见的疾病之一.除了颈部溃烂、腹甲上有多处红色病斑等外观症状外,内脏器官也发生了一系列的病变:表现为腹腔积水;肝、脾肿大,肝内有斑块状淤血.组织观察结果显示肝细胞索排列紊乱,细胞质颗粒变性;脾脏内淋巴细胞增殖;小肠绒毛脱落,固有层淋巴小结增生,黏膜下层、肌层、浆膜层也有不同程度的病变;胃出血,上皮细胞脱落;肾小球萎缩,肾间质充血,肾小管表面纤毛断裂;胰的腺泡解体等.     

遗传标记技术在中华鳖研究中的应用

综述了遗传标记在中华鳖种群差异性分析中的应用,同时对中华鳖种质资源分子评价的未来发展趋势进行了简要的讨论,以期为进一步了解中华鳖的遗传背景,发掘中华鳖的遗传潜力以及种质改良奠定基础,也为同类研究提供参考.     

鄱阳湖中华鳖染色体核型、G带和Ag-NORs的分析

以常规方法制备鄱阳湖中华鳖的染色体标本,分析其核型。其核型公式为2n=66=4M+8Sm+16T+38mc,NF=78。用胰酶法制备染色体G-带,绘制了G带模式图。采用了稍加修改的Foresti方法研究鄱阳湖中华鳖染色体的Ag-NORs核型,其Ag-NORs数目主要为2个,多态性主要表现为银染粒的大小和染色的     

中华鳖种质资源的研究现状及保护、利用对策

从形态特征、养殖性能、细胞水平、同工酶和DNA分子水平介绍了中华鳖种质资源的研究现状,探讨了目前中华鳖种质资源研究中存在的薄弱环节,并对中华鳖种质资源的开发、保护和利用提出了对策．     

中华鳖肺炎克雷伯氏菌病的病原研究

从患病中华鳖血液,肝脏,腹水,肌肉中共分离到2株细菌,腹腔注射感染试验均出现与自然发病相似的症状,死亡率为100%,此2株细菌的形态特征及生理生化反应完全一致;革兰氏阴性杆菌,无鞭毛,不运动,兼性厌氧,发酵葡萄糖产酸产气,过氧化氢酶,七叶苷,VP,赖氨酸脱羧酶,ONPG反应,膛酶均为阳性,发酵肌醇,甘露醇,蔗溏,阿拉伯糖,乳糖,麦芽糖,草糖,鼠李糖,蜜二糖,木糖,棉子糖,纤维二糖产酸,氧化酶,精氨酸双水解酶,吲哚,鸟氨酸脱羧酶,苯内氨酸脱氨酶,明胶酶,H2S均为阴性,能还原硝酸盐等,其形态特征及生理生化反应同肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种基本相同,故鉴定为肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种,该菌对先锋霉素VI、复达欣、头孢呋肟、菌必治等药物高度敏感。     

中华鳖肌肉组织双向电泳的条件优化

通过不同的样品处理方式、IPG缓冲液浓度、染色方法和pH等条件的对比试验,优化建立了中华鳖肌肉组织蛋白质的双向电泳技术体系.结果表明:蛋白样品经试剂盒纯化后可显著提高等电聚焦效果;IPG缓冲液浓度为0.5%的聚焦效果好于2.0%浓度;考染所获蛋白质点较少,而银染所获蛋白质点明显增多;pH 4～7胶条的等电聚焦效果明显好于pH 3～10的胶条.     

中华鳖稚鳖荧光标记技术研究

采用红色和绿色荧光可视植入胶体(Visible Implant Elastomer,VIE)对刚孵化的中华鳖稚鳖前肢腹面进行了标记养殖实验.红色、绿色和对照组稚鳖在第30天、第60天、第90天和第120天平均体重分别为(15.18±0.73)g、(15.54±0.82)g、(15.33±0.79)g;(40.37±1.50)g、(40.94±1.60)g、(40.70±1.66)g;(75.64±2.97)g、(74.59±3.27)g、(75.45±2.80)g和(122.01±7.27)g、(124.15±8.06)g、(124.76±7.28)g.红色、绿色和对照组稚鳖第120天成活率分别为96.0%、95.0%和95.3%.红色标记在整个实验期间保持率为100%.绿色标记在第30天和第60天保持率为100%,第90天和第120天保持率分别为96.7%和95.0%.研究结果表明:VIE标记对稚鳖的生长发育和成活率影响小,标记保持率较高,是一种适合刚孵化稚鳖的标记方法.     

改良的QuEChERS与HPLC-HESI/MS/MS同时测定中华鳖组织中氯硝柳胺和酰胺醇类药物及其代谢物的残留量

建立了中华鳖(Trionyx sinensis)组织(血浆、肌肉、裙边、肝脏和肾脏)中氯硝柳胺、氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺同时测定的高效液相色谱-加热电喷雾电离源串联质谱法(HPLC-HESI/MS/MS)。样品经改进的QuEChERS方法提取净化,以氨化乙腈为提取剂,十八烷基硅烷键合硅胶(C18)粉为净化剂,甲醇-水为流动相,流速为0.3 mL/min,以Waters Symmetry~ C_(18)(2.1 mm×100 mm,3.5μm)为色谱分离柱,采用正负离子分段扫描和多反应监测模式(MRM)检测。氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺采用内标标准曲线法定量,氯硝柳胺采用基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明,在0.3~100μg/L范围内,5种待测物均呈良好的线性关系,相关系数(r2)均不小于0.998 7。在1~20μg/kg加标水平下,中华鳖空白血浆、肌肉、裙边、肝脏和肾脏的加标回收率为77.9%~105.3%(n=6),相对标准偏差为2.7%~10.5%(n=6),方法的检出限分别为0.5、0.1、0.5、0.5、0.5μg/kg,定量下限分别为1.0、0.3、1.0、1.0、1.0μg/kg。该方法操作简便、准确、灵敏度高,适用于中华鳖组织中氯硝柳胺、氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量的同时测定。     

中华鳖温和气单胞菌病的病原研究

从表现为背腹甲及四肢出现疖疮、裙边糜烂的患病鳖的心血、肝脏及腹腔液中分离到 NL、Nb1和Nb2 三株细菌 .经菌体形态特征、培养特性和生理生化特性测定 ,均鉴定为温和气单胞菌 ( Aeromonassobria) .小白鼠感染试验显示三株菌均有毒力 ,用 9× 10 8CFU/m LNL 菌株进行人工感染 30～ 4 0 g健康鳖 ,发病率为 10 0 % .从感染鳖的肝脏中分离到与原分离株形态及生理生化特性相同的菌株 .用 NL 菌株制备的抗血清分别与 Nb1和 Nb2 菌株进行玻板凝集试验 ,能发生明显的凝集反应 .药敏试验结果表明 :三株细菌对菌必治、头孢氨噻肟、头孢羧甲噻肟均呈高度敏感